低溫生物的復壯措施

① 純種分離。采用平板劃線分離法、稀釋平板法或涂布法均可。把仍保持原有典型優(yōu)良性狀的單細胞分離出來，經(jīng)擴大培養(yǎng)恢復原菌株的典型優(yōu)良性狀，若能進行性能測定則更好。還可用顯微鏡操縱器將生長良好的單細胞或單孢子分離出來，經(jīng)培養(yǎng)恢復原菌株性狀。

② 通過寄主體內(nèi)生長進行復壯(如Bacillus thuringiensis的復壯)。主要是對一些寄生性的菌株，可以將衰的菌株接種到相應的宿主體內(nèi)，提高其寄生性能及其它性能。

③ 淘汰已衰的個體(采用比較激烈的理化條件進行處理，以殺生命力較差的已衰個體)?？梢圆捎酶鞣N外界不良理化條件，使發(fā)生衰的個體死去，多功能復合低溫生物菌種報價，從而留下群體中生長健壯的個體.如:對"5406"抗生菌的分生孢子進行-30-10度的低溫處理5-7天，使80%死去，多功能復合低溫生物菌種廠家，在抗低溫個體中可找到健壯的個體.

④ 采用有效的保藏方法。

低溫生物菌種純化方法

1、傾注平板法

首先把微生物懸液通過一系列稀釋，取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40~50°左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基充分混合，然后把這混合液傾注到無菌的培養(yǎng)皿中，待凝固之后，把這平板倒置在恒箱中培養(yǎng)。單一細胞經(jīng)過多次增殖后形成一個菌落，取單個菌落制成懸液，重復上述步驟數(shù)次，便可得到純培養(yǎng)物 2、涂布平板法

首先把微生物懸液通過適當?shù)南♂?，取一定量的稀釋液放在無菌的已經(jīng)凝固的營養(yǎng)瓊脂平板上，然后用無菌的玻璃刀把稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面上，經(jīng)恒溫培養(yǎng)便可以得到單個菌落。3、平板劃線法

簡單的分離微生物的方法是平板劃線法。用無菌的接種環(huán)取培養(yǎng)物少許在平板上進行劃線。劃線的方法很多，常見的比較容易出現(xiàn)單個菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、四格法等。當接種環(huán)在培養(yǎng)基表面上往后移動時，接種環(huán)上的菌液逐漸稀釋，多功能復合低溫生物菌種，然后在所劃的線上分散著單個細胞，經(jīng)培養(yǎng)，每一個細胞長成一個菌落。

2、富集培養(yǎng)法

富集培養(yǎng)法的方法和原理非常簡單。我們可以創(chuàng)造一些條件只讓所需的微生物生長，在這些條件下，所需要的微生物能有效地與其他微生物進行競爭，在生長能力方面遠遠超過其他微生物。所創(chuàng)造的條件包括選擇合適的碳源、能源、溫度、光、pH、滲透壓和氫受體等。在相同的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下，經(jīng)過多次重復移種，然后富集的菌株很容易在固體培養(yǎng)基上長出單菌落。如果要分離一些專性寄生菌，就必須把樣品接種到相應敏感宿主細胞群體中，使其大量生長。通過多次重復移種便可以得到純的寄生菌。

生物有機肥產(chǎn)品生產(chǎn)安全性分析

雖然目前生物有機肥產(chǎn)品生產(chǎn)大多采用植物根際促生菌， 但近年來很多研究發(fā)現(xiàn)，芽孢菌屬和類芽孢菌個別菌株能產(chǎn)生菌素。 即便在安全分級目錄中列為一級免做理學試驗的， 如枯草芽孢菌、 多類芽孢菌、 地衣芽孢菌等個別菌株也檢測到部分溶血素基因， 潛在危害不容忽視。 因此， 開展生物有機肥產(chǎn)品生產(chǎn)生物安全風險評價， 從上把好安全關是產(chǎn)品質(zhì)量安全的首要保障。通過調(diào)研發(fā)現(xiàn)， 用于生物有機肥產(chǎn)品的部分生產(chǎn)分類地位不明確， 甚至混亂， 難以從上進行安全風險的初步識別 。 以常見生產(chǎn)枯草芽孢菌為例， 實際上是一個表型相似的群體， 包括枯草芽孢菌、 地衣芽孢菌、 短小芽孢菌、解淀粉芽孢菌、 深褐 （萎縮） 芽孢菌、莫哈韋（莫杰夫） 芽孢菌、 死谷芽孢菌、 索諾拉沙漠芽孢菌、 特基拉芽孢菌、暹羅芽孢菌等 10個緣種。生產(chǎn)企業(yè)送檢的枯草芽孢菌生物有機肥產(chǎn)品， 經(jīng)鑒定發(fā)現(xiàn)很多產(chǎn)品實際為解淀粉芽孢菌， 且許多菌株具有很強的溶血作用。通過對生產(chǎn)企業(yè)調(diào)研發(fā)現(xiàn)， 部分生產(chǎn)企業(yè)選擇分離于動物腸道的解淀粉芽孢菌作為產(chǎn)品生產(chǎn)用菌株， 該類生產(chǎn)發(fā)酵周期短、 活菌數(shù)量高、 生產(chǎn)成本低， 但產(chǎn)品的應用功效不佳， 溶血風險大 ， 建議慎用。而植物來源的解淀粉芽孢菌溶血風險小， 產(chǎn)品應用效果好， 推薦使用。

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