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低溫生物寶藏的目的
微生物在使用和傳代過程中常常容易發(fā)生污染、變異甚至死掉的情況,因而常常造成的衰變,并有可能使優(yōu)良丟失。因此保藏的重要意義就在于盡可能的保持其原有性狀和活力的穩(wěn)定性,還有確保不死、不變異、不被污染,保持菌株優(yōu)良性狀不退化,保持優(yōu)良菌株存活,以達到便于研究、交換和使用等諸方面的需要。
低溫生物的改良制備
即采用遺傳育種的方法,使菌株(從自然界分離篩選而得的出發(fā)菌株)的遺傳因子 DNA發(fā)生突變、重組,降Z總氮低溫生物菌種廠家,從而從中選出產(chǎn)量高、成品質(zhì)量好或具有新的培養(yǎng)特性如耐產(chǎn)物抑制、能利用廉價原料以及具有生產(chǎn)新品種能力的優(yōu)良。采用的方法有誘變育種、雜交育種、細胞融合技術(shù)和重組DNA技術(shù)。誘變育種是利用誘變因子如紫外線、鈷-60、乙烯類等物理或化學誘變劑處理生產(chǎn)菌株的單孢子懸浮液,降Z總氮低溫生物菌種多少錢,以獲得誘發(fā)突變株。隨后進行突變株的篩選,從中篩選高產(chǎn)菌株。由于隨機的突變?nèi)后w中,有益突變所占比例很低,要獲得高產(chǎn)突變株必須進行大量篩選??筛鶕?jù)生物合成途徑中的反應(yīng)點,并通過它們的改變以提高產(chǎn)率或其他特性,降Z總氮低溫生物菌種,如選育抗產(chǎn)物反饋抑制的突變株、增加細胞透性的突變株及營養(yǎng)缺陷型的突變株等。這種"理性篩選法"廣泛應(yīng)用于氨基酸產(chǎn)生菌的選育。
低溫生物菌種純化方法
1、傾注平板法
首先把微生物懸液通過一系列稀釋,取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40~50°左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基充分混合,然后把這混合液傾注到無菌的培養(yǎng)皿中,待凝固之后,把這平板倒置在恒箱中培養(yǎng)。單一細胞經(jīng)過多次增殖后形成一個菌落,取單個菌落制成懸液,重復上述步驟數(shù)次,便可得到純培養(yǎng)物 2、涂布平板法
首先把微生物懸液通過適當?shù)南♂專∫欢康南♂屢悍旁跓o菌的已經(jīng)凝固的營養(yǎng)瓊脂平板上,然后用無菌的玻璃刀把稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面上,經(jīng)恒溫培養(yǎng)便可以得到單個菌落。3、平板劃線法
簡單的分離微生物的方法是平板劃線法。用無菌的接種環(huán)取培養(yǎng)物少許在平板上進行劃線。劃線的方法很多,常見的比較容易出現(xiàn)單個菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、四格法等。當接種環(huán)在培養(yǎng)基表面上往后移動時,接種環(huán)上的菌液逐漸稀釋,然后在所劃的線上分散著單個細胞,經(jīng)培養(yǎng),每一個細胞長成一個菌落。
2、富集培養(yǎng)法
富集培養(yǎng)法的方法和原理非常簡單。我們可以創(chuàng)造一些條件只讓所需的微生物生長,在這些條件下,降Z總氮低溫生物菌種價格,所需要的微生物能有效地與其他微生物進行競爭,在生長能力方面遠遠超過其他微生物。所創(chuàng)造的條件包括選擇合適的碳源、能源、溫度、光、pH、滲透壓和氫受體等。在相同的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下,經(jīng)過多次重復移種,然后富集的菌株很容易在固體培養(yǎng)基上長出單菌落。如果要分離一些專性寄生菌,就必須把樣品接種到相應(yīng)敏感宿主細胞群體中,使其大量生長。通過多次重復移種便可以得到純的寄生菌。
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