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2D和3D環(huán)境下培養(yǎng)的細胞相比較,諸多生理指標都顯著不同,例如原代小鼠管腔上皮細胞(mammaryluminal epithelial cells, MEC)在3D基底膜基質(zhì)中增殖的時間明顯長于2D培養(yǎng)環(huán)境;更有甚者,有時作用于2D培養(yǎng)的細胞呈現(xiàn)的效應(yīng)與3D細胞相反。3D培養(yǎng)可以設(shè)計模擬體內(nèi)的生理環(huán)境,讓細胞在生理行為上與機體實際的生理環(huán)境更接近。隨著在生物相關(guān)性,PGA,通量,產(chǎn)出量等方面的改進,伴隨3D培養(yǎng)成本的降低,3D培養(yǎng)在再生醫(yī)學(xué),基礎(chǔ)研究和研發(fā)中的應(yīng)用將越來越廣泛,PGA三維細胞培養(yǎng)支架,一場細胞由2D培養(yǎng)走向3D的變革正在發(fā)生。
靜電紡絲法以六氟異丙1醇(HFIP)為溶劑,將質(zhì)量比為70∶30的SF/COL(絲素/膠原)和PLLC(聚左旋乳酸己內(nèi)酯)共混制備質(zhì)量比為0∶100,30∶70,50∶50,70∶30,100∶0的8%SF/COL/PLCL的三維納米纖維支架,25%蒸汽交聯(lián)48h后檢測各組比例支架材料的理化性能及生物性能。掃描電鏡顯示納米纖維形貌良好,均為納米級別;X射線衍射結(jié)果顯示交聯(lián)后材料結(jié)晶度增強,SilkⅠ構(gòu)象由α-折疊形成穩(wěn)定的β-折疊;材料交聯(lián)后為疏水性,PLCL的加入明顯改善材料的親水性能;熱穩(wěn)定性隨著PLCL濃度的增加也愈加穩(wěn)定,交聯(lián)后尤其明顯。細胞培養(yǎng)實驗證明,隨著培養(yǎng)時間延長,細胞在不同比例的支架上粘附、鋪展和增殖均良好,但hPDLSCs與配比為30∶70的SF/COL/PLCL支架復(fù)合后增殖速率快。
天然ECM作為支持材料的3D培養(yǎng)
這種方法以天然ECM作為支持材料,PGA組織培養(yǎng)支架,根據(jù)培養(yǎng)細胞類型,優(yōu)化3D培養(yǎng)基質(zhì)配方,以滿足不同組織細胞的培養(yǎng)需求。很多公司都可提供細胞外基質(zhì)產(chǎn)品用于3D培養(yǎng),PGA3D細胞培養(yǎng)支架,例如TAP Biosystems(已被Sartorius Stedim Biotech收購)的RAFT膠原系統(tǒng),Matrigel模擬基底膜基質(zhì)產(chǎn)品;Advanced BioMatrix,Amsbio和Sigma-Aldrich公司也都有細胞外基質(zhì)凝膠產(chǎn)品。但天然基質(zhì)材料存在一定病原風(fēng)險,且材料可能存在批次差別性等缺點。
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