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現(xiàn)有的細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠的應(yīng)用中會(huì)碰到哪些問(wèn)題?
1)Matrigel(基質(zhì)凝膠)很難處理, 只能在低溫條件下溶解, 而且,不同批次間的產(chǎn)品在性能上、品質(zhì)上會(huì)有不同,即使來(lái)自同一個(gè)廠家也不可避免;
2)相對(duì)來(lái)說(shuō),建立的微環(huán)境并不十分穩(wěn)定, 較佳培養(yǎng)時(shí)間一般不會(huì)超過(guò)5天,且售價(jià)并不便宜;
3)重組層粘連蛋白和纖連蛋白僅適用于某些類型的細(xì)胞, 非常不穩(wěn)定且昂貴;
4)聚鳥氨酸通常與層粘連蛋白結(jié)合使用, 主要限于神經(jīng)元細(xì)胞。
使用PHENODRIVE重組液體對(duì)常見塑料、玻璃培養(yǎng)耗材表面進(jìn)行涂布:
對(duì)于這類耗材表面的涂布應(yīng)用, 通常建議將PHENODRIVE 凍干粉末溶解進(jìn)75% 的乙醇中, 按要求的濃度進(jìn)行重組,細(xì)胞3d培養(yǎng)基質(zhì)膠瓊脂, 將經(jīng)過(guò)濾的重組溶液澆鑄在需要涂布的器皿表面,并在無(wú)菌的環(huán)境下讓其自然蒸發(fā)(建議紫外線照射的無(wú)菌環(huán)境下), 待溶劑蒸發(fā)盡后, 即在器皿表面留下一層透明的薄膜,即完成涂布的過(guò)程。一些電紡原料具有很好的生物相容性及可降解性,可作為載體進(jìn)入人體,并容易被吸收。
建議:在無(wú)情況下種植細(xì)胞, 待細(xì)胞粘附后再添加, 比如在細(xì)胞種植3小小時(shí)后。
示例、
PHENODRIVE 新型合成基質(zhì)膠在懸浮細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用, 如在β細(xì)胞、羊膜上皮細(xì)胞和的共培養(yǎng)中, PHENODRIVE-Y 促進(jìn)β細(xì)胞、羊膜上皮細(xì)胞和羊膜球體的形成, 從而產(chǎn)生胰島素。對(duì)靜電紡絲過(guò)程的深入研究涉及到靜電學(xué)、電流體力學(xué)、流變學(xué)、空氣動(dòng)力學(xué)等領(lǐng)域。下圖中紅色染顯示由PHENODRIVE-Y 誘導(dǎo)的大且穩(wěn)定的細(xì)胞球體內(nèi)胰島素產(chǎn)生的細(xì)胞。(經(jīng)過(guò)使用PHENODRIVE-Y重組液)
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