低溫生物知多少？

實驗室的傳代保藏過程

1. 按說明書要求復溶菌粉，轉種于適當的增菌培養(yǎng)基內（G1），復壯后轉接至平板上，并于適當溫度下培養(yǎng)適當時間，好氧低溫生物菌種廠家，分離出單個純種菌落，此為第2代（G2）。

2. 鑒定完成后，挑取純菌落制成濃菌懸液用于制備甘油冷凍管，同時挑取純菌落轉接斜面作為工作用。此時，保藏為第2代，但工作用則為第三代。

3. 將第2代管冷凍保存，將工作用于適當溫度下培養(yǎng)適當時間后可用于試驗。

4. 取一支冷凍保存的G2代轉種于平板和斜面培養(yǎng)基上，平板上的制成冷凍保藏管第三代（G3），斜面培養(yǎng)基經適當溫度下培養(yǎng)適當時間后用作工作用（W3）。

5. 將第三代（G3）冷凍或低溫保存，將生長、轉種后的G2經滅菌處理后丟棄。

6. 當工作用代數小于5時，可直接用上一代工作用轉接下一代工作用，如W3可直接轉接為W4。

7. 按上述程序操作，直至G4轉為W5為止，需重新開啟安瓿，再重復上述操作程序、保藏和使用。

以上方法中，被分為兩類。傳代用和工作用，傳代用用于甘油冷凍管法保藏，工作用用斜面低溫保藏法保藏。

實驗證明，甘油冷凍管的有效期至少為2年，但其主要適用于細菌（需氧）、酵母菌的傳代、保藏、真菌和芽孢類細菌則需應用其它方法。

                                                       低溫生物貯存的方式

1.冷凍真空干燥法。將已培養(yǎng)、生長豐富的菌體或孢子懸浮于滅菌的、卵白、脫脂奶制成菌懸液，將懸液以無菌操作分裝于滅菌的玻璃安瓿瓶中，每管約0.3-0.5毫升，然后用耐壓橡皮管與冷凍干燥裝置連接，安瓿瓶放在冷凍槽中于-30℃至-40℃迅速冷凍，并在冷凍狀態(tài)下抽空干燥，并在真空狀態(tài)下熔封安瓿，在-20℃保存，一般可保存十年以上，但成本較高。

     2.液氮超低溫保藏法。首先將要保藏的制成菌懸液備用；其次，準備安瓿瓶，每瓶加入0.8毫升冷凍保護劑10%（體積比）甘油蒸餾水溶液，塞棉塞滅菌（1公斤/平方厘米，5分鐘）。無菌檢查后，降Z總氮低溫生物菌種廠家，接入要保藏的，降COD低溫生物菌種廠家，火焰熔封瓶口，檢查是否漏氣，將封好口的安瓿瓶放在凍結器內，以每分鐘下降1℃的速度緩慢降溫，使保藏品逐步均勻地凍結，低溫生物菌種廠家，直至-35℃，以后凍結速度就不需控制，安瓿凍結后立即放入液氮罐內，在-150至-196℃保藏，該法只有少數科研院所使用。

                                                            低溫生物烘干方法

微生物低溫烘干裝置是用于對微生物進行烘干使用的裝置，通過產生較低的熱量，對微生物進行長時間的烘干，在不破壞微生物的同時去除微生物中的水分，廣泛的使用在微生物的培育實驗場合，而微生物低溫烘干裝置已經無法滿足人們的使用，需要更方便使用的微生物低溫烘干裝置；在微生物低溫烘干裝置使用時，無法對放置的微生物進行旋轉，導致了微生物受熱面積不夠均衡，從而烘干的不夠，同時，不能夠對放置的位置和高度進行調整，從而不方便不同體積的微生物器皿擺放進行烘干。

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