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細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,常常因?yàn)榄h(huán)境帶來(lái)的污染而影響細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量,甚至直接導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)的失??!這些污染可能來(lái)自于以下幾個(gè)方面,例如:
1、空氣:空氣是微生物及塵埃顆粒傳播的主要途徑??諝饬鲃?dòng)性大,如果培養(yǎng)操作場(chǎng)地于外界隔離不嚴(yán)格或消毒不充分,外界不潔空氣很容易進(jìn)入造成污染。因此,培養(yǎng)設(shè)施不能設(shè)在通風(fēng)場(chǎng)所。無(wú)菌操作應(yīng)在凈化臺(tái)內(nèi)進(jìn)行,工作時(shí)要帶口罩,以免因講話、咳嗽等使外界污染進(jìn)入操作面,造成污染。
2、器材:各種培養(yǎng)器皿、器械消毒不和洗刷不干凈導(dǎo)致污染,另外需要對(duì)培養(yǎng)箱進(jìn)行定期消毒,防止形成污染
3、操作:實(shí)驗(yàn)操作無(wú)菌觀念不強(qiáng),技術(shù)不熟練,使用污染的器皿或封瓶不嚴(yán)等,都可以造成污染。培養(yǎng)兩種細(xì)胞以上時(shí),操作不規(guī)范,交叉使用吸管或培養(yǎng)液、瓶等有可能導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
4、培養(yǎng)液:有些培養(yǎng)液在生產(chǎn)時(shí)就已經(jīng)被支原體或病毒等污染,變成了污染。
5、樣本:原代培養(yǎng)的污染多數(shù)來(lái)源于樣本;
美國(guó)Synthecon3D細(xì)胞培養(yǎng)灌入式RCCS-RCMW三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)灌入 式 培養(yǎng)系統(tǒng)
該 系統(tǒng)可以從外部培養(yǎng)瓶不間斷的給 細(xì)胞室 供給養(yǎng)分。細(xì)胞通過(guò)分子量 截留膜 保留于細(xì)胞室。連續(xù)養(yǎng)分 供給 并 檢測(cè) pH 值,氧和葡萄糖水平培養(yǎng)基通過(guò)一個(gè)軟管泵連續(xù)的流經(jīng)旋轉(zhuǎn)細(xì)胞培養(yǎng)皿以及外部硅膠氧合器.培養(yǎng)基可以交換,取樣,或在停止以及不停止培養(yǎng)皿旋轉(zhuǎn)的情況下改動(dòng)。該系統(tǒng)可以 通過(guò)用戶安裝的內(nèi)置傳感器來(lái)監(jiān)測(cè)內(nèi)部的 pH 值,氧氣和葡萄糖水平。旋轉(zhuǎn)灌入 式RCMW 由一個(gè)單轉(zhuǎn)頭基座,電源和操作手冊(cè)組成??梢詳U(kuò)展到 培養(yǎng) 更大的移植組織。
什么是傳代細(xì)胞培養(yǎng)?
原代細(xì)胞或細(xì)胞株或細(xì)胞系需在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的原代細(xì)胞或細(xì)胞株或細(xì)胞系或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù),微重力細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng),這個(gè)過(guò)程體外培養(yǎng)稱為傳代細(xì)胞培養(yǎng)。一般認(rèn)為,細(xì)胞培養(yǎng)形成單層匯合,細(xì)胞密度與生存空間有密切的關(guān)系,將培養(yǎng)細(xì)胞分散,以1:2或l:3或1:4以上的比率轉(zhuǎn)移分散進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數(shù)期和停止期。
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