高效液相色譜的基本原理

色譜法的分離原理是：溶于流動(dòng)相(mobilephase)中的各組分經(jīng)過(guò)固定相時(shí)，由于與固定相(stationphase)發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強(qiáng)弱不同，在固定相中滯留時(shí)間不同，山東高效液相色譜，從而先后從固定相中流出。又稱(chēng)為色層法、層析法。高效液相色譜法以經(jīng)典的液相色譜為基礎(chǔ)，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，高效液相色譜哪家效果好，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有顆粒極細(xì)的高效固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。

高效液相色譜檢測(cè)法

01高效液相色譜以經(jīng)典的液相色譜為基礎(chǔ)，是以高壓下的液體為流動(dòng)相的色譜過(guò)程。通常所說(shuō)的柱層析、薄層層析或紙層析就是經(jīng)典的液相色譜。所用的固定相為大于１００ｕｍ 的吸附劑（ 硅膠、氧化鋁等）。這種傳統(tǒng)的液相色譜所用的固定相粒度大，傳質(zhì)擴(kuò)散慢，因而柱效低，分離能力差，只能進(jìn)行簡(jiǎn)單混合物的分離。而高效液相所用的固定相粒度小（５ｕｍ-１０ｕｍ）、傳質(zhì)快、柱效高。  

高效液相色譜法（ＨＰＬＣ）是２０世紀(jì)６０年代后期發(fā)展起來(lái)的一種分析方法。近年來(lái)，在保健的食品功效成分、營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑、維生素類(lèi)、蛋白質(zhì)的分離測(cè)定等應(yīng)用廣泛。世界上約有８０％的有機(jī)化合物可以用ＨＰＬＣ來(lái)分析測(cè)定。        

HPLC的動(dòng)力系統(tǒng)：泵

泵是HPLC的動(dòng)力系統(tǒng)。氣相色譜的動(dòng)力，實(shí)際上是鋼瓶中氣體的壓力。而液體，它只有通過(guò)泵的轉(zhuǎn)動(dòng)而使之流動(dòng)。

我們做一個(gè)類(lèi)比：血液類(lèi)比成流動(dòng)相，心臟類(lèi)比成泵。血管類(lèi)比成各不銹鋼管。那么，血液在心臟作為動(dòng)力系統(tǒng)，高效液相色譜費(fèi)用，流經(jīng)著身體的各個(gè)系統(tǒng)。如果心臟跳得快點(diǎn)，那么血流量加大，那么血壓升高。同樣，高效液相色譜價(jià)格，泵流速提高，流動(dòng)相流量增大，那么色譜系統(tǒng)壓力增大；如果血管被壓迫半堵了，那么同樣的心跳速度，壓力也會(huì)增大。同樣道理，如果色譜系統(tǒng)被污染，那么污染物堵在色譜柱頭，或者各連接口等，那么泵同樣的流速，就有可能壓力變大。高效液相色譜主要出問(wèn)題的就是壓力莫名地增大，一般認(rèn)為是色譜系統(tǒng)被污染而堵，解決的方法就是查看各個(gè)部件，或者清洗流路等。

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