細胞交叉污染對細胞的影響及污染物的檢測

細胞培養(yǎng)中，細胞間交叉污染并不罕見，多是由于在培養(yǎng)中操作時各種細胞同時進行，混雜使用器皿和液體所致，這種污染能使細胞的生長特性、形態(tài)特征等發(fā)生變化，有些變化較輕、不易察覺，有些可能由于污染的細胞具有生長優(yōu)勢終壓過原來細胞而導(dǎo)致細胞的生長抑制，三維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)，終。常用觀察細胞形態(tài)學、分析生長特性和核型、檢測細胞的標記物等方法檢測交叉污染的細胞。

       細胞傳代的一般操作方法是在開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全，一般主要有細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH 培養(yǎng)液或MEM 培養(yǎng)液或199 等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、慶大溶液（1 萬單位）、7.5％NaHC03 溶液、0.25％胰蛋白酶、PBS 洗液等。工具有小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1）、細胞吹打管（20 ml）(以上用具需經(jīng)121℃至少15 分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱等；

       操作步驟一般是鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可X疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-0.2%LH 培養(yǎng)液100ml 內(nèi)，加入滅活小牛血X清10m1，慶大溶液0.3m1，7.5%碳酸氫鈉溶液3ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS 洗液沖洗細胞表面1-2 次，每次10m1，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1 細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，賽斯康三維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中，三維體外細胞培養(yǎng)，再加入10m1 細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，鶴崗三維細胞培養(yǎng)，置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2～4 天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。

       以上方法僅供參考！

       RCCS可提供在模擬的微重力效應(yīng)下細胞、組織的三維高分化的培養(yǎng)。RCCS是一款圍繞水平單軸旋轉(zhuǎn)的旋轉(zhuǎn)細胞培養(yǎng)系統(tǒng)，結(jié)合其配套的HARV 或者STLV等生物反應(yīng)容器，可以實現(xiàn)反應(yīng)容器內(nèi)部100%充滿培養(yǎng)液的、無機械攪拌的（區(qū)別于傳統(tǒng)的機械攪拌裝置的旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)系統(tǒng)）、無液體湍流的低剪切力的三維旋轉(zhuǎn)動態(tài)培養(yǎng)。該培養(yǎng)技術(shù)方法可以得到具有與微重力環(huán)境下培養(yǎng)出的細胞幾乎類似的特征現(xiàn)象，因此RCCS是一款可以模擬微重力效應(yīng)的旋轉(zhuǎn)三維細胞培養(yǎng)系統(tǒng)。