一般是以微生物屬名的第yi個(gè)字母和種名的前兩個(gè)字母組成，第四個(gè)字母表示菌株（品系）。例如，從Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性內(nèi)切酶稱為Bam H，在同一品系細(xì)菌中得到的識(shí)別不同堿基順序的幾種不同特異性的酶，可以編成不同的號(hào)，如HindⅡ、HindⅢ，HpaI、HpaⅡ，MboI、MboⅡ等。

別名：restriction endonuclease簡(jiǎn)稱限制酶

酶反應(yīng)：限制性內(nèi)切酶能分裂DNA分子在一限定數(shù)目的專一部位上。它能識(shí)別外源DNA并將其降解。

單位定義：在指明pH與37℃，在0.05mL反應(yīng)混合物中，1小時(shí)消化1μg的λDNA的酶量為1單位。

性狀制品不含非專一的核酸水解酶（由10單位內(nèi)切酶與1μg λDNA，保溫16小時(shí)所得的凝膠電泳圖譜的穩(wěn)定性表示），這類酶主要是從原核生物中分離出來(lái)的，迄今已經(jīng)從近300多種不同的微生物中分離出約4000種限制酶。

限制酶的特點(diǎn)

限制酶是識(shí)別特定的核苷酸序列，并在每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割的一類酶。

根據(jù)酶的功能特性、大小及反應(yīng)時(shí)所需的輔助因子，限制性內(nèi)切酶可分為兩大類，快切酶，即I類酶和Ⅱ酶。早先從大腸桿1菌中發(fā)現(xiàn)的EcoK、EcoB就屬于I類酶。

其分子量較大；反應(yīng)過(guò)程中除需Mg2 外，還需要S-腺苷-L甲硫氨酸、ATP；在DNA分子上沒有特異性的酶解片斷，這是I、Ⅱ類酶之間zui明顯的差異。

Ⅱ類酶有EcoR I、BamH I、Hind Ⅱ、Hind Ⅲ等。其分子量小于105道爾頓；反應(yīng)只需Mg2 ；重要的是在所識(shí)別的特定堿基順序上有特異性的切點(diǎn)，因而DNA分子經(jīng)過(guò)Ⅱ類酶作用后，可產(chǎn)生特異性的酶解片斷，這些片斷可用凝膠電泳法進(jìn)行分離、鑒別。

酶切圖譜

圖譜介紹：DNA限制性內(nèi)切酶酶切圖譜，又稱DNA的物理圖譜，它由一系列位置確定的多種限制性內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)組成，以直線或環(huán)狀圖式表示。在DNA序列分析、基因組的功能圖譜繪制、DNA的無(wú)性繁殖、基因文庫(kù)的構(gòu)建等工作中，建立限制性內(nèi)切酶圖譜都是不可缺少的環(huán)節(jié)，近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的RFLP（限制性的片段長(zhǎng)度多態(tài)性）技術(shù)更是建立在它的基礎(chǔ)上。

構(gòu)建方法：構(gòu)建DNA限制性內(nèi)切酶圖譜有許多方法。通常結(jié)合使用多種限制性內(nèi)切酶，通過(guò)綜合分析多種酶單切及不同組合的多種酶同時(shí)切所得到的限制性的片段大小來(lái)確定各種酶的酶切位點(diǎn)及其相對(duì)位置。酶切圖譜的使用價(jià)值依賴于它的準(zhǔn)確性和準(zhǔn)確程度。

制作過(guò)程：在酶切圖譜制作過(guò)程中，為了獲得條帶清晰的電泳圖譜，一般DNA用量約為0.5-1μg。限制性內(nèi)切酶的酶解反應(yīng)zui適條件各不相同，各種酶有其相應(yīng)的酶切緩沖液和zui適反應(yīng)溫度（大多數(shù)為37℃）。對(duì)質(zhì)粒DNA酶切反應(yīng)而言，限制性內(nèi)切酶用量可按標(biāo)準(zhǔn)體系1μg DNA加1單位酶，消化1-2小時(shí)。但要完全酶解則必須增加酶的用量，一般增加2-3倍，甚至更多，反應(yīng)時(shí)間也要適當(dāng)延長(zhǎng)。

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