脂質(zhì)體法

　　是用帶正電荷的脂質(zhì)體作載體攜帶外源基因，與帶負(fù)電荷的細(xì)胞膜融合，把外源基因?qū)爰?xì)胞。用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)化原生質(zhì)體，其毒性較電1擊法和PEG法小，逆轉(zhuǎn)錄病毒滴度測定，且適于運輸大分子DNA穿過質(zhì)膜。

　　Antonelli等（1990）用該法將基因組DNA轉(zhuǎn)入BMS玉米原生質(zhì)體，獲得轉(zhuǎn)化了的再生愈傷組織，轉(zhuǎn)化率高達8%。

　　脂質(zhì)體法的優(yōu)點是轉(zhuǎn)化受體為單個細(xì)胞，易于篩選，不易形成嵌合體，對于原生質(zhì)體再生能力好的植物品種，是非常好的轉(zhuǎn)化方法。

位點特異性重組法

這類方法使用來源于噬菌體的重組酶，這類重組酶能夠識別特異性序列位點(長度數(shù)十堿基對至數(shù)百堿基對)并引發(fā)含有該位點的序列之間的重組；在腺病毒骨架和穿梭質(zhì)粒中添加重組酶能夠識別的特異性位點，在細(xì)胞內(nèi)表達對應(yīng)的噬菌體重組酶或體外使用重組酶，介導(dǎo)骨架質(zhì)粒和穿梭質(zhì)粒之間的位點特異性重組，將目的基因引入骨架質(zhì)粒，形成帶有重組腺病毒基因組的腺病毒質(zhì)粒；轉(zhuǎn)染包裝細(xì)胞，進行病毒載體拯救。該方法進一步簡化了腺病毒質(zhì)粒的制備過程，它的缺限是在腺病毒基因組的某些部位不可避免的殘留了重組酶特異性識別位點。

基因轉(zhuǎn)化法

氣動式基因中具有代表性的是PDS-1000/He，利用由不同厚度的聚苯四甲酰亞1胺膜制成的可裂圓片來調(diào)控氦氣壓力。當(dāng)氦氣壓力達到可裂圓片的臨界承受壓力時，可裂圓片破1裂并產(chǎn)生強烈的氣流，使微彈載體攜帶微彈高速運動，遇到剛性的阻擋網(wǎng)，微彈載體被阻遏，而微彈利用慣性繼續(xù)向前高速運動，轟擊靶1細(xì)胞或組織，從而攜帶外源基因進入細(xì)胞內(nèi)?；蚍ú辉偈艿绞荏w基因型的限制，又能避開原生質(zhì)體再生的障礙，從而使植物的遺傳轉(zhuǎn)化翻開了新的一頁。

基因轉(zhuǎn)化法在植物遺傳轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用：應(yīng)用基因法轉(zhuǎn)化zui早的是Klein等人在1987年將攜帶有細(xì)菌氯霉1素乙酰轉(zhuǎn)移酶（cat）基因的煙1草花葉病毒的RNA導(dǎo)入洋蔥的表皮細(xì)胞，使此基因得到表達。后來，隨著對物理參數(shù)（如金屬粒子的理化特性、DNA與金屬粒子的結(jié)合和靶組織特性等）、環(huán)境條件（如受體植株、外植體和靶組織所適宜的溫度、濕度和光照等）和生物因子（如外植體及其轟擊前后的培養(yǎng)條件等）等的技術(shù)優(yōu)化，不斷完善的基因轉(zhuǎn)化技術(shù)能實現(xiàn)對許多受體材料的轉(zhuǎn)化，包括原生質(zhì)體、懸浮細(xì)胞系、愈傷組織、外植體（幼穗、幼胚或成熟胚），甚至可以直接轟擊轉(zhuǎn)化花粉。

逆轉(zhuǎn)錄病毒滴度測定-友名生物由武漢友名生物技術(shù)有限公司提供。武漢友名生物技術(shù)有限公司實力不俗，信譽可靠，在湖北 武漢 的其它等行業(yè)積累了大批忠誠的客戶。友名生物帶著精益求精的工作態(tài)度和不斷的完善創(chuàng)新理念和您攜手步入輝煌，共創(chuàng)美好未來！