科學(xué)家在培養(yǎng)轉(zhuǎn)0基因植物時(shí)，常用什么中的質(zhì)粒作為載體？

（1）具有較小的分子量。經(jīng)驗(yàn)表明，為了避免在DNA的純化過(guò)程中發(fā)生鏈的斷裂，克1隆載體的分子大小建議不要超過(guò)10Kb。pBR質(zhì)粒這種小分子量的特點(diǎn)，不僅易于自身DNA的純化，而且可容納較大的外源DNA部分片段；

（2）具有兩種抗1菌素抗性基因可供作轉(zhuǎn)化子的選擇記號(hào)，能指示載體或重組DNA分子是否進(jìn)入宿主細(xì)胞以及外源DNA分子是否插入載體分子形成了重組子。標(biāo)記基因往往可以賦予宿主細(xì)胞一種新的表型，這種轉(zhuǎn)化細(xì)胞可明顯地區(qū)別于非轉(zhuǎn)化細(xì)胞。當(dāng)我們把一個(gè)DNA部分片段插入到某一個(gè)標(biāo)記基因內(nèi)時(shí)，該基因就失去了相應(yīng)的功能。當(dāng)把這種重組DNA分子轉(zhuǎn)到宿主細(xì)胞后，該基因原來(lái)賦予的表型也就消失了。要是仍保留了原來(lái)表型的轉(zhuǎn)化細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)含有的DNA分子一定不是重組子。很顯然，逆轉(zhuǎn)錄病毒滴度測(cè)定，既要指示外源DNA是否進(jìn)入了宿主細(xì)胞，又要指示載體DNA分子中是否插入了外源DNA部分片段，那么這種載體必須至少具有兩個(gè)標(biāo)記基因。另外，pBR質(zhì)粒載體還具較高的拷貝數(shù)，而且經(jīng)過(guò)氯霉1素?cái)U(kuò)增之后，每個(gè)細(xì)胞中可積累1000~3000個(gè)拷貝，這就為重組體DNA的制備提供了極大的方便。

基因是控制生物性狀的基本遺傳單位。19世紀(jì)60年代，奧地利遺傳學(xué)家格雷戈?duì)枴っ系聽(tīng)柧吞岢隽松锏男誀钍怯蛇z傳因子控制的觀點(diǎn)，但這僅僅是一種邏輯推理。20世紀(jì)初期，遺傳學(xué)家摩爾根通過(guò)果蠅的遺傳實(shí)驗(yàn)，認(rèn)識(shí)到基因存在于染色體上，并且在染色體上是呈線性排列，從而得出了染色體是基因載體的結(jié)論。1909年丹麥遺傳學(xué)家約翰遜（W. Johansen，1859～1927）在《精密遺傳學(xué)原理》一書(shū)中正式提出“基因”概念。

腺病毒表達(dá)

   腺病毒系統(tǒng)是很受歡迎的可以在任何哺乳動(dòng)物細(xì)胞中有效瞬時(shí)表達(dá)的基因遞送平臺(tái)。對(duì)于難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，如原代或非分裂細(xì)胞，采用病毒遞送外源基因的方式是非常有效的選擇。鐘鼎生物采用293A腺病毒包裝細(xì)胞系（含有腺病毒包裝所必需的E1基因序列，是專(zhuān)為生產(chǎn)腺病毒和進(jìn)行滴度測(cè)定而建立的），用于高滴度的copy缺陷型（E1和E3缺失）腺病毒的生產(chǎn)，以進(jìn)行外源基因的表達(dá)。腺病毒感1染幾乎所有的細(xì)胞類(lèi)型，除了一些抗腺病毒感1染的淋巴1瘤細(xì)胞。腺病毒是研究原代非增殖細(xì)胞基因表達(dá)的zui佳系統(tǒng)，它可以使轉(zhuǎn)化細(xì)胞和原代細(xì)胞中得到的結(jié)果直接進(jìn)行對(duì)比；不整合到染色體中，無(wú)插入致突變性。能有效進(jìn)行增殖，滴度高：腺病毒系統(tǒng)可產(chǎn)生108 pfu/ml原液，濃縮后可達(dá)1010-1011 VP/ml，這一特點(diǎn)使它非常適用于基因cure。

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