酶底物法步驟少，檢測試劑，會(huì)更有優(yōu)勢

實(shí)驗(yàn)步驟越少，colitag檢測試劑，結(jié)果偏差也會(huì)越小，所以酶底物法步驟少，會(huì)更有優(yōu)勢。在做稀釋時(shí)，應(yīng)保證取樣量大，譬如10倍稀釋：取10ml原液 90ml無菌水配成100ml10倍稀釋液；若是要百倍千倍稀釋，則需要進(jìn)行梯度稀釋，由中的10倍稀釋樣再取10ml，再加90ml無菌水，此時(shí)完成了100倍的稀釋。若是千倍稀釋，則需要從100倍稀釋樣中再取 10ml進(jìn)行稀釋。

乳糖蛋白水培養(yǎng)基試管的分離

1）自來水①初發(fā)酵：取2個(gè)裝有50mL三倍濃縮乳糖蛋白胨水培養(yǎng)基的三角燒瓶，各加入100mL水樣；取10支裝有5mL三倍濃縮乳糖蛋白胨水培養(yǎng)基的試管，各加入10mL水樣?；靹蚝螅?7℃培養(yǎng)24h（24h未產(chǎn)氣的繼續(xù)培養(yǎng)至48h）。②平板分離：將24h培養(yǎng)后產(chǎn)酸、產(chǎn)氣及48h培養(yǎng)后產(chǎn)酸、產(chǎn)氣的發(fā)酵管（瓶）中的菌液，分別劃線接種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，于37℃培養(yǎng)18～24h，將符合下列特征的菌落進(jìn)行涂片、革蘭氏染色和鏡檢：（a）深紫黑色、有金屬光澤；（b）紫黑色、不帶或略帶金屬光澤；（c）淡紫紅色、中心顏色較深。③酵：經(jīng)涂片、染色和鏡檢后，如為革蘭氏陰性無芽孢，則挑取該菌落，重新接種于普通濃度的乳糖蛋白胨水培養(yǎng)基試管中，大腸菌群檢測試劑，每管可接種同類型菌落1～3個(gè)，于37℃培養(yǎng)24h，若結(jié)果是產(chǎn)酸又產(chǎn)氣，即證實(shí)有大腸菌群存在。根據(jù)初發(fā)酵試驗(yàn)的陽性管（瓶）數(shù)查附表11-2，即得大腸菌群數(shù)。

多管發(fā)酵法測定水中大腸菌群的操作方法

池水、河水或湖水①稀釋水樣：將水樣稀釋成10-1與10-2。②初發(fā)酵：分別吸取1mL10-2、10-1的稀釋水樣和1mL原水樣，注入裝有10mL普通濃度乳糖蛋白胨試管中。另取10mL和100mL原水樣，分別注入裝有5mL和50mL三倍濃縮乳糖蛋白胨水培養(yǎng)基的試管和三角燒瓶中。③以下步驟同上述“自來水”的平板分離和酵試驗(yàn)。所加水樣體積為100、10、1、0.1mL的發(fā)酵管結(jié)果；水樣體積為10、1、0.1、0.01mL的發(fā)酵管結(jié)果，即得每升水樣中的大腸菌群數(shù)。

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