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調(diào)整流量過快…防止壓力、溫度急劇變化和機(jī)械振動(dòng)。氣溫驟降或使色譜柱從高處落下，都會(huì)影響柱內(nèi)填充狀態(tài)；柱壓突然升高或降低，也會(huì)對(duì)柱內(nèi)填充物產(chǎn)生沖力，所以在調(diào)節(jié)流速時(shí)要緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩(如前面所述)。反向色譜柱…一般情況下，色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指示柱可以反沖時(shí)，才能反沖去除留在柱頭的雜質(zhì)。反之，反向?qū)⒀杆俳档椭?。預(yù)加保護(hù)柱為了避免破壞固定相，應(yīng)選擇合適的流動(dòng)相(特別是 pH)。有時(shí)候，一預(yù)柱可以在進(jìn)樣器前連接，分析柱是硅膠粘合時(shí)，預(yù)柱為硅膠，可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱前先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)溶解。

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不要把復(fù)雜的樣品，特別是生物樣品直接注入到柱中，需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，或者在進(jìn)樣器與色譜柱之間連接一個(gè)保護(hù)柱。保護(hù)柱一般為填充具有相似固定相的短柱?？梢砸矐?yīng)該經(jīng)常更換保護(hù)柱。【前輩經(jīng)驗(yàn)】如何排除小概率故障？【1】泵壓跳動(dòng)，跳動(dòng)范圍約10 bar。對(duì)策：原來的小白頭有點(diǎn)臟，換了以后還沒有解決；2、將主動(dòng)閥上的閥芯取出，發(fā)現(xiàn)類似于氣泡的存在，在超聲5分鐘內(nèi)浸入-水溶液中試著除去氣泡，重新安裝后觀察，仍未解決；更換新閥芯，安裝完畢后，再也沒有跳動(dòng)，觀察一段時(shí)間后比較平穩(wěn)，順利解決。

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常規(guī)除氣方法1.吹氦脫氣。使用氦氣在液體中溶解度低于空氣這一特性，在0.1 MPa壓力下，大約60 mL/min的流速通入流動(dòng)相儲(chǔ)液容器10~15 min，就能有效地將溶解的空氣從流動(dòng)相中排除，可有效排除80%的氧氣。利用一種的分布式噴射裝置，一體積中的氦氣可以從流動(dòng)相中幾乎全部體積中排除。這就是說，1 L氦氣可以通過1 L流動(dòng)相進(jìn)行排氣。這樣的脫氣方法是好的，但是我國氦氣價(jià)格比較高，很少有實(shí)驗(yàn)室采用這種方法。

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2.加熱回流法。該方法的脫氣效果較好。運(yùn)行時(shí)要注意冷凝塔的冷卻效率，否則溶劑流失，混流相比例將發(fā)生變化。3.抽真空除氣。這種方法可以用真空泵，將溶解氣體降到0.05~0.07 MPa。但真空脫氣將改變混合溶劑的組成，從而影響實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性，故多用于單溶劑體系的分析。4.超聲波除氣。超聲波清洗機(jī)內(nèi)用超聲波對(duì)欲脫氣進(jìn)行振蕩10~20分鐘。該方法的脫氣效果差。5.聯(lián)機(jī)通風(fēng)?，F(xiàn)商品 HPLC儀表，可與線式脫氣機(jī)配套。聯(lián)機(jī)除氣簡單，故障少，效果好。推薦購買儀器時(shí)一定要購買，有些公司為選購件，所以與儀器公司談配置時(shí)要和公司確認(rèn)。

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移動(dòng)相中受熱，或流動(dòng)相不同組分混合將產(chǎn)生氣體，氣泡進(jìn)入泵內(nèi)造成壓力波動(dòng)，色譜圖上出現(xiàn)毛刺?？梢栽囉靡韵路椒▉斫鉀Q問題：流動(dòng)相再脫氣；采用更有效的脫氣方法或兩者配合使用；改系統(tǒng)外混合前進(jìn)行混合。HPLC使用的流動(dòng)相必須預(yù)先除氣，邯鄲棕色螺口樣品瓶銀色鋁蓋，否則很容易在系統(tǒng)中漏氣，50ml棕色螺口樣品瓶銀色鋁蓋，影響泵的工作。在體系中產(chǎn)生氣泡：流動(dòng)相本身存在，梯度淋洗混合后會(huì)放出氣泡；氣泡的影響：存在于管道中，系統(tǒng)壓力不穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏離；存在于單向閥中，容易導(dǎo)致液體回流，流量不準(zhǔn)確，甚至不吸液存在于檢測(cè)器中，2mL棕色螺口樣品瓶銀色鋁蓋，對(duì)檢測(cè)器產(chǎn)生影響。因此對(duì)液相相對(duì)流動(dòng)相的氣泡和雜質(zhì)要求比較嚴(yán)格。汽泡對(duì)柱子的分離效率有影響，檢測(cè)器的靈敏度、基線穩(wěn)定性甚至不能檢測(cè)。(噪音增加、基線不穩(wěn)定、突然跳動(dòng))。

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另外，溶解在流動(dòng)相中的氧也可以與樣品、流體相甚至固定相(如胺)反應(yīng)。溶氣還會(huì)引起溶劑 pH值的變化，給分離和分析結(jié)果帶來誤差。溶氧能與某些溶劑(例如，、四氫)形成紫外吸收絡(luò)合物，這種配合物能夠改善背景吸收(尤其是低于260 nm)，并導(dǎo)致探測(cè)靈敏度的輕微下降，但更重要的是，會(huì)造成基線漂移或形成鬼峰(假峰)。熒光檢測(cè)中，在一定條件下，溶解氧也會(huì)引起溶解氧，4mL棕色螺口樣品瓶銀色鋁蓋，尤其是芳香烴、脂肪醛、酮等。有時(shí)，熒光反應(yīng)可降至95%以上。電化學(xué)檢測(cè)(尤其是還原電化學(xué)法)對(duì)氧的影響較大。去除流動(dòng)相中的溶解氧，將大大提高紫外檢測(cè)器的性能，并提高某些熒光檢測(cè)應(yīng)用中的靈敏度。常見的脫氣方法有：加熱煮沸、抽真空、超聲波、吹氦等。對(duì)于混合溶劑，采用抽氣或煮沸的方法，需考慮因溶劑揮發(fā)較低而引起的成分變化。

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