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一般來(lái)說(shuō)，Diol固相萃取柱批發(fā)，我們需要分離的混合物的性質(zhì)各不相同，很難通過(guò)調(diào)整 PH來(lái)達(dá)到要求。一般而言，在改變流動(dòng)相 PH的基礎(chǔ)上，又加入緩沖鹽以改變組分的選擇性和分離程度。大多數(shù)C18反相分離柱在使用

一、強(qiáng)酸淋洗、強(qiáng)堿

用硅膠作載體的粘結(jié)相填料，其使用要求是：流動(dòng)相 PH值在2.5-7.5之間。在 PH<2時(shí)，流動(dòng)相可能與載體硅膠和合相發(fā)生水解反應(yīng)，從而導(dǎo)致碳鏈損失；在 PH<7時(shí)，流動(dòng)相可能使載體硅膠溶解。因此，硅膠基體C18 (即 ODS)在強(qiáng)堿條件下基本壽命較短，聚合體C18雖然能在高堿性條件下穩(wěn)定工作，但其價(jià)格昂貴，分離性能及模組強(qiáng)度均不如 ODS。

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改進(jìn)凈化方式

在一般情況下，目標(biāo)化合物模式比雜質(zhì)模式的凈化效果要好，如果要分析的是某種特定種類(lèi)的化合物，則較好是用保留目標(biāo)化合物的模式來(lái)分析；舉一個(gè)簡(jiǎn)單的例子，也就是對(duì)蔬菜中的多菌靈和塞菌靈(一類(lèi)堿性農(nóng)1藥)進(jìn)行分析，用陽(yáng)離子交換柱可專(zhuān)一性地保留這些農(nóng)1藥，使其與干擾物基本完全分離，而用正相吸附劑或石墨化炭黑進(jìn)行保留干擾物的操作只能去除主要的干擾物，保留干擾物的數(shù)量較多。

此外，如果可以用多個(gè) SPE柱對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行凈化，應(yīng)選擇選擇性好的吸附劑；選擇性越高，離子交換>正相>反相。

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聚乙烯醇小柱活化平衡的目的有二，一是使官能團(tuán)填料的粘附性和伸縮性保持對(duì)目標(biāo)化合物的大吸附活性，另一種目的是去除填料本身可能引入的雜質(zhì)。硅膠鍵合C18，是一種在硅膠微球表面粘結(jié)的疏水性C18官能團(tuán)，為使其對(duì)目標(biāo)物保持充分吸附活性，需要在濕潤(rùn)環(huán)境上樣物在填料表層形成的液膜(活化平衡)與上樣物的溶劑分子具有良好的相容性，目標(biāo)物在膜間進(jìn)行傳質(zhì)，與膠接C18發(fā)生疏水作用時(shí)，目標(biāo)物與膠接C18本身并不具有水浸潤(rùn)性，直接上樣物，C18蜷縮，而較強(qiáng)的疏水性則使其難以與目標(biāo)物中的目標(biāo)物分子充分接觸，因此， HLB小柱采用聚合物改性材料，增加了親水基團(tuán)，使其在上樣物的環(huán)境中與目標(biāo)物分子充分接觸，而發(fā)生傳質(zhì)，使目標(biāo)物在上樣物的環(huán)境中完全保留。

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反相萃取通常用于化合物的預(yù)處理，正如反相色譜是色譜中常用的分離方法一樣，反相萃取中的淋洗液通常是一種水相或含水的緩沖溶液，除去水分后，可方便地進(jìn)行干燥、濃縮。

有些項(xiàng)目，白山Diol固相萃取柱，在淋洗步驟完成后，直接用一定量的洗脫液，如1 ml洗脫，這個(gè)過(guò)程中洗脫和定容集是一步處理，前一步處理必然會(huì)影響洗脫步驟的定量結(jié)果。

也就是溶劑互溶問(wèn)題，當(dāng)淋洗過(guò)程中使用的溶劑極性與洗脫溶劑極性的差別較大時(shí)，就會(huì)產(chǎn)化分層，洗脫阻力大，洗脫液容易被稀釋等問(wèn)題，造成洗脫效果不同，從而導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果。

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反相模式下，Diol固相萃取柱分類(lèi)，溶劑體系的極性應(yīng)以樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的次序遞減，并以遞增程度遞減。要確保所選擇的樣本溶劑不會(huì)洗脫目標(biāo)物，所選擇的淋洗劑應(yīng)在不洗脫目標(biāo)物的前提下，很大限1度地洗脫干擾物，所選洗脫劑應(yīng)能碰巧完全洗脫目標(biāo)物。

正相位模式是 SPE小柱相的固定相極性大于流動(dòng)相極性的分離模式。主要用途：

固相萃取材料極性表面與物極性官能團(tuán)極性相互作用；極性力比非極性力強(qiáng)，但比離子力弱；常用的極性基團(tuán)有羥基，胺基，巰基等。弱極化基質(zhì)環(huán)境有利于形成極性力，因?yàn)槿鯓O化溶劑不能與極性固定相形成氫鍵功能團(tuán)。結(jié)果表明： SPE正相萃取后，樣品基質(zhì)多為弱極性，如正己烷、二1氯甲1烷、菜油等，而目標(biāo)物多含有極性官能團(tuán)。

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渠道效應(yīng)

當(dāng) SPE小柱填料裝實(shí)后，流速過(guò)小柱時(shí)，液體是以層流通過(guò)填料層，Diol固相萃取柱品牌，將填料層充分浸潤(rùn)，潤(rùn)濕的液面截層向上推進(jìn)，見(jiàn)附圖；流速過(guò)大時(shí)，柱床厚度過(guò)大，可能在填料內(nèi)形成溝道，液流將穿過(guò)溝道，快速通過(guò)小柱，而使填料浸潤(rùn)不足，從而使得體與填料的接觸面積大大減少，嚴(yán)重影響填料對(duì)目標(biāo)物質(zhì)的保留性。

溶液環(huán)境的 pH如何影響化合物在柱狀物上的保持性，我們?yōu)槭裁匆P(guān)注該化合物的 pKa值，這些因素需要放在C18柱狀物上嗎？

A：首先， Ka指酸度系數(shù)，也稱(chēng)為酸離解常數(shù)，可以被理解為酸離解H離子的能力，而 pKa=- lgKa，對(duì)于酸，在環(huán)境中 pH離子的平衡如下

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