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在實際工作中，人們經(jīng)常希望 SPE柱可以多次使用以降低成本。美國瓦瑞安公司生產(chǎn)的 BOND ELUT CERTIFY SPE柱(J. Chromatogr.137:619;1993)的重復使用情況：當樣本基液為血漿時，該 SPE柱經(jīng)再生后可重復使用2-3次(回收率可維持80%以上)。據(jù)報告，還可重復使用10次 SPE柱(J. Chromatogr.307:371;1986)。這種新型薄膜 SPE柱的再生相對比較容易，而且可以多次重復使用。

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有些人曾嘗試過15次以上重復使用這種類型的柱子。固相萃取柱的再利用主要依賴于樣品基液的復雜性。越復雜的基液，越不可能重復使用 SPE柱。要小心地重復使用 SPE柱。，使用過的 SPE柱子必須再生。更好的方法是用完后立即再生。二是要對再生后的 SPE柱進行評價，確保其本底可接受，回收率可接受。

固相萃取小柱 SPE工藝的基本步驟：

萃取柱的活性處理：選擇一種溶劑通過 SPE小柱潤濕和活化 SPE填料，使分析物能夠與固相表面緊密接觸，易于發(fā)生吸附作用，并可去除柱中可能存在的雜質(zhì)，減少污染；隨后還要選擇一種易更換的溶劑，該溶劑具有急性毒性，湘潭固相萃取柱， PH值與樣品基體相似，可使樣品溶液與吸附劑表面良好接觸，提高粗去效率。

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一般來說，我們需要分離的混合物的性質(zhì)各不相同，很難通過調(diào)整 PH來達到要求。一般而言，固相萃取柱選擇，在改變流動相 PH的基礎上，又加入緩沖鹽以改變組分的選擇性和分離程度。大多數(shù)C18反相分離柱在使用

一、強酸淋洗、強堿

用硅膠作載體的粘結(jié)相填料，其使用要求是：流動相 PH值在2.5-7.5之間。在 PH<2時，流動相可能與載體硅膠和合相發(fā)生水解反應，從而導致碳鏈損失；在 PH<7時，流動相可能使載體硅膠溶解。因此，硅膠基體C18 (即 ODS)在強堿條件下基本壽命較短，聚合體C18雖然能在高堿性條件下穩(wěn)定工作，但其價格昂貴，分離性能及模組強度均不如 ODS。

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改進凈化方式

在一般情況下，目標化合物模式比雜質(zhì)模式的凈化效果要好，固相萃取柱類型，如果要分析的是某種特定種類的化合物，則較好是用保留目標化合物的模式來分析；舉一個簡單的例子，也就是對蔬菜中的多菌靈和塞菌靈(一類堿性農(nóng)1藥)進行分析，用陽離子交換柱可專一性地保留這些農(nóng)1藥，使其與干擾物基本完全分離，而用正相吸附劑或石墨化炭黑進行保留干擾物的操作只能去除主要的干擾物，保留干擾物的數(shù)量較多。

此外，如果可以用多個 SPE柱對目標化合物進行凈化，應選擇選擇性好的吸附劑；選擇性越高，離子交換>正相>反相。

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(在使用這些清潔溶劑之前，可與柱子供應商協(xié)商，以確保它們不會對填料造成損害。硅樹脂基質(zhì)中的柱狀物一般都可以用，但是某些洗滌溶劑的配方可能導致有機聚合物基質(zhì)的填充物膨脹或收縮，從而影響其色譜特性。)此外，確保上表所用的清潔溶劑與以前使用的溶劑可互溶，丙i醇可作為良好的過渡。每一個溶劑系統(tǒng)至少要沖洗20個液柱體積。因為某些溶劑系統(tǒng)粘度較大，應相應調(diào)整沖洗流速，以確保不超過泵的壓力。在用完胍或脲等溶劑清洗過的柱子上，至少要用40~50柱體積的 HPLC級純水進行沖洗。對反相柱來說，不推薦使用十二烷基磺酸鈉(SDS)和 Trition等表面活性劑，因為這些化合物一定會牢固地吸附到硅膠結(jié)合相柱上，因此難以去除。使用表面活性劑可以改變填料的表面性能。但是， SeparationGroup的研究表明：多肽合成過程中產(chǎn)生的保護基和清除劑對柱體的污染，可通過向流動相中加入500μ L1% SDS溶液，以1 ml/min的速度清除。以5%~95% EBN/1%(v/v)的三i氟乙i酸梯度洗脫后，在平衡起始條件下，固相萃取柱供應商，柱體的多肽分離功能得以恢復。

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在反相-固相萃取模式中，溶劑體系的極性應按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞減，而溶劑體系的洗脫強度應逐漸增加。要確保所選的樣本溶劑不會洗脫目標化合物，所選的淋洗劑應在不洗脫目標化合物的前提下，zui大限度地洗脫干擾物，所選的洗脫劑應能恰巧完全洗脫目標化合物。在許多固相萃取材料的極性表面和樣品中目標化合物的極性官能團之間會產(chǎn)生極性力。通常使用極性力的吸附劑在色譜中被稱為正相色譜吸附劑。極性力比非極性力更強，但比離子力更弱。常用的極性基團有羥基，胺基，巰基等。

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