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調(diào)整流量過(guò)快…防止壓力、溫度急劇變化和機(jī)械振動(dòng)。氣溫驟降或使色譜柱從高處落下，都會(huì)影響柱內(nèi)填充狀態(tài)；柱壓突然升高或降低，也會(huì)對(duì)柱內(nèi)填充物產(chǎn)生沖力，所以在調(diào)節(jié)流速時(shí)要緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過(guò)緩(如前面所述)。反向色譜柱…一般情況下，色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指示柱可以反沖時(shí)，才能反沖去除留在柱頭的雜質(zhì)。反之，反向?qū)⒀杆俳档椭АｎA(yù)加保護(hù)柱為了避免破壞固定相，應(yīng)選擇合適的流動(dòng)相(特別是 pH)。有時(shí)候，一預(yù)柱可以在進(jìn)樣器前連接，分析柱是硅膠粘合時(shí)，預(yù)柱為硅膠，可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱前先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)溶解。

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不要把復(fù)雜的樣品，特別是生物樣品直接注入到柱中，需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，或者在進(jìn)樣器與色譜柱之間連接一個(gè)保護(hù)柱。保護(hù)柱一般為填充具有相似固定相的短柱?？梢砸矐?yīng)該經(jīng)常更換保護(hù)柱。【前輩經(jīng)驗(yàn)】如何排除小概率故障？【1】泵壓跳動(dòng)，跳動(dòng)范圍約10 bar。對(duì)策：原來(lái)的小白頭有點(diǎn)臟，換了以后還沒(méi)有解決；2、將主動(dòng)閥上的閥芯取出，發(fā)現(xiàn)類(lèi)似于氣泡的存在，云浮棕色螺口樣品瓶銀色鋁蓋，在超聲5分鐘內(nèi)浸入-水溶液中試著除去氣泡，重新安裝后觀(guān)察，仍未解決；更換新閥芯，安裝完畢后，再也沒(méi)有跳動(dòng)，觀(guān)察一段時(shí)間后比較平穩(wěn)，順利解決。

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除氣采用流動(dòng)相脫氣，可避免 HPLC系統(tǒng)的故障，從而順利地獲得理想的數(shù)據(jù)。HPLC系統(tǒng)中不希望有氣泡存在。HPLC泵在輸送液體時(shí)會(huì)產(chǎn)生很大的作用力，因?yàn)闅怏w的壓縮比比液體大得多，所以有氣泡出現(xiàn)時(shí)，你會(huì)看到瞬時(shí)流速降低，系統(tǒng)壓力降低。若此氣泡足夠大，液相泵將無(wú)法輸送任何溶劑，并且當(dāng)壓力降到預(yù)定的壓力下限以下時(shí)，泵將停止工作。一些泵的設(shè)計(jì)很好的排除了氣泡，而有些泵的設(shè)計(jì)在有氣泡的情況下會(huì)停止工作。

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在輸液泵中，由于系統(tǒng)壓力較大，氣泡通常會(huì)在流動(dòng)相溶液中溶解，并與液柱相通。但當(dāng)進(jìn)入檢測(cè)器流通池后，系統(tǒng)壓力又恢復(fù)到氣壓，因此氣泡可能再次出現(xiàn)在檢測(cè)器流通池中，在色譜柱上會(huì)出現(xiàn)不規(guī)律的毛刺。在 UV/VIS/UV/VIS)探測(cè)器的液相色譜圖中，噪音毛刺通常是氣泡進(jìn)入和通過(guò)循環(huán)池的信號(hào)。另外，電化學(xué)(EC)檢測(cè)儀對(duì)流動(dòng)相中的溶解氧的存在十分敏感，20mL棕色螺口樣品瓶銀色鋁蓋，它是由被測(cè)物質(zhì)在電極表面發(fā)生氧化還原反應(yīng)引起電流變化的。另外，泡泡的存在有時(shí)會(huì)造成保留時(shí)間不重復(fù)。因此，必須注意消除流動(dòng)相中的空氣，同時(shí)也要防止管道內(nèi)的空氣(例如 PTFE管)向流動(dòng)相滲透。

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色譜條件：通常的色譜條件包括流動(dòng)相、色譜柱、檢測(cè)波長(zhǎng)、流速和進(jìn)樣量。移動(dòng)相是指在制備流動(dòng)相所用水和試劑試液時(shí)，水的電阻率一般不超過(guò)18.2兆歐，而水的電阻率不超過(guò)18.2兆歐，其原因是為了防止水和試劑試液中雜質(zhì)對(duì)色譜結(jié)果的干擾，測(cè)試液采用色譜級(jí)別。用不同的方法對(duì)色譜柱會(huì)有不同的要求，但是每一種色譜柱都有其清潔要求，這在色譜柱中可以找到，必須按照以上的要求來(lái)進(jìn)行，否則會(huì)導(dǎo)致色譜柱效下降，色譜柱的使用壽命縮短，檢測(cè)波長(zhǎng)會(huì)因品種的不同而有不同的要求，這里需要指出的是要注意觀(guān)察檢測(cè)器燈能量的變化，如基線(xiàn)波動(dòng)大，活性成分的響應(yīng)值突然變小等，對(duì)檢測(cè)器電鏡能量的變化有可能是突然變小等。流動(dòng)速度也因品種而異，4mL棕色螺口樣品瓶銀色鋁蓋，一般為1.0 ml/min，流速不能隨意改變，18-400棕色螺口樣品瓶銀色鋁蓋，尤其作為 QC人員，但作為研發(fā)人員，有時(shí)為了摸索條件或進(jìn)行方法耐用性驗(yàn)證，會(huì)改變流速來(lái)評(píng)估該方法的適用性。對(duì)不同品種的進(jìn)樣量也有不同的規(guī)定，進(jìn)樣量這個(gè)現(xiàn)在都是自動(dòng)進(jìn)樣，所以進(jìn)樣精密度都是很好的，不用特別強(qiáng)調(diào)。

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，作為液相操作人員，必須認(rèn)真學(xué)習(xí)夜想說(shuō)明書(shū)，掌握液相硬件和軟件的操作，掌握日常維護(hù)，掌握基本故障的排除與維修。普通液相的操作規(guī)程也是由操作人員起草的，所以只要嚴(yán)格按照操作要求操作，一般都不會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題，當(dāng)然要特別指出的是對(duì)液相的日常維護(hù)保養(yǎng)，如：液相的日常維護(hù)保養(yǎng)，泵密封墊的清洗，系統(tǒng)管路的清洗，溶劑過(guò)濾頭的清洗等。第二，操作者在配制液相分析樣品時(shí)，好由同一人單獨(dú)完成，以免不必要的意外誤差。

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