巴氏染色液【檢驗(yàn)方法】

1、將涂片置于95%乙醇中固定5分鐘以上，視細(xì)胞涂層的厚薄及雜質(zhì)的多少，可適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間；

2、取出，依次浸入80%、50%的乙醇中各約30秒，然后用蒸餾水潤洗；

3、用素染液（A液）染8-14分鐘，直到染色明顯為止后，（染色時(shí)間長(zhǎng)短，依據(jù)染色液中的乙醇揮發(fā)程度及染色液染片數(shù)量和診斷醫(yī)生判讀標(biāo)準(zhǔn)而定；同時(shí)室內(nèi)溫度對(duì)染色效果及時(shí)間也有一定的影響。）取出后，用蒸餾水沖洗，除凈多余的染液；

4、用0.5～1%鹽酸乙醇分化數(shù)秒（使細(xì)胞片呈淡橙紅色）；再置于稀溶液中反藍(lán)約30秒，使細(xì)胞片呈藍(lán)色或紫藍(lán)色，然后用蒸餾水沖洗；

5、依次放入50%、80%的乙醇中各30秒，放入95%乙醇中脫水2分鐘；

6、用橘黃G染液（B液）染色1-2分鐘，取出，用95%乙醇清洗2次；

7、在95%乙醇中脫水2分鐘；

8、用EA50染液（C液)染6-8分鐘，取出于95%乙醇中洗兩次，各1分鐘；

9、用無水乙醇脫水，二中浸泡透吸1-2分鐘，使細(xì)胞及細(xì)胞核透明，然后用中性樹膠等封和蓋玻片封固，鏡檢。

細(xì)菌染色液是利用單一染料對(duì)細(xì)菌進(jìn)行染色的一種方法。此法操作簡(jiǎn)便，適用于菌體一般形狀和細(xì)菌排列的觀察。

　　細(xì)菌染色液為堿性染料這是因?yàn)椋涸谥行?、堿性或弱酸性溶液中，細(xì)菌細(xì)胞通常帶負(fù)電荷，而堿性細(xì)菌染色液在電離時(shí)，其分子的染色部分帶正電荷，巴氏染色液批發(fā)，因此堿性細(xì)菌染色液的染色部分很容易與細(xì)菌結(jié)合使細(xì)菌著。染色后的細(xì)菌細(xì)胞與背景形成鮮明的對(duì)比，在顯微鏡下更易于識(shí)別。

巴氏染色液的使用注意事項(xiàng)

　　    1、冬季氣溫較低時(shí)，素染色液不易著色，巴氏染色液，可適當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間。

　　    2、橘黃G染色液染色時(shí)間不宜過長(zhǎng)，巴氏染色液采購，且在乙醇中要盡量洗凈多余的染色液，否則會(huì)影響EA50染色液或EA36染色液的著色。

　　    3、請(qǐng)不要將新舊批號(hào)的EA50染色液或EA36染色液混合使用。

　　    4、該試劑盒貯存時(shí)，盡量避免高溫及光亮環(huán)境以免影響品質(zhì)和效果

　　    5、巴氏染色液僅用于體外診斷，應(yīng)由人士使用及進(jìn)行結(jié)果的判讀。

　　    6、使用前應(yīng)詳細(xì)閱讀說明書，巴氏染色液廠家，并做好個(gè)人衛(wèi)生防護(hù)，在有效期內(nèi)使用，生產(chǎn)日期、生產(chǎn)批號(hào)和失效日期見包裝。

　　    7、用后應(yīng)按醫(yī)院或要求處置廢棄物。

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