組織固定,時間不宜太短,標(biāo)本固定液,也不宜太長。時間太短,就不能很多的固定組織,因為不管組織大小,固定液浸入組織之中,都需要有一定的時間,時間太短,就會影響組織固定的效果,對以后一系列關(guān)系的處理都有影響,切片質(zhì)量難以保證,固定時間太長,也不好。組織長時間的固定,福爾0馬林會產(chǎn)生一種酸,影響核的染色。對于固定很長時間的陳列性標(biāo)本制片后切片染色不鮮艷,顯得非常陳舊。另外,長時間的固定往往會出現(xiàn)福爾0馬林色素,尤其是造血器0官的標(biāo)本,更應(yīng)注意。固定時間過長,可降低抗原的活性。
好的固定液還是丙0酮。因為如果使用福爾0馬林固定液、石蠟切片顯示酸堿磷酸酶就顯示不好,病毒的包函體就會消失掉,又如醋酸,它對膠原纖維等有膨脹的作用。由于各種固定液對不同的組織有不同的作用,因此許多將根據(jù)各種固定液的優(yōu)缺點,配制出許多混合液的方法來,給組織的良好固定起到了非常積極的作用。但是,值得指出的是并非所有的固定液都不是十全十美的,例如,酒精、甲醛、醋酸固定液,武漢固定液,對組織固定很好,組織中各物質(zhì)的染色也十分清晰,但對固定脫水盒為銅質(zhì)的組織時,效果就不好,原因是醋酸跟酮可發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生醋酸銅,沉淀于組織中,可造成對抗原的損害,對于組織化學(xué)的顯示,經(jīng)實驗證明:可呈弱陽性乃至陰性。由此可見,固定液的選擇正確與否決定著對某些病例的組化標(biāo)記的成敗關(guān)鍵。在我們的日常工作科研中,對于組織的固定,應(yīng)有針對性的選擇,方能獲得滿意的效果。

當(dāng)前,應(yīng)用于固定試劑的種類較多,它們對于固定不同的組織成分起著不同的作用,因此我們在使用時應(yīng)該了解不同固定劑的效能,才能合理的固定組織。根據(jù)Bencroft的分類法,將不同的固定劑分為四種類型:Ⅰ類:醛類,甲醛,組織固定液,多聚甲醛,已二醛,丙二醛等。Ⅱ類:氧化劑類,(奧酸)等。Ⅲ類:蛋白變性類,乙醇,醋酸等。Ⅳ類:其他,氯化,細胞固定液,等
上述四種類型的固定劑,常使用的是甲醛,其余的也在其它病理技術(shù)方面中用到。
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