巴氏染色液【檢驗(yàn)方法】

1、將涂片置于95%乙醇中固定5分鐘以上，巴氏染色液批發(fā)，視細(xì)胞涂層的厚薄及雜質(zhì)的多少，可適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間；

2、取出，依次浸入80%、50%的乙醇中各約30秒，然后用蒸餾水潤(rùn)洗；

3、用素染液（A液）染8-14分鐘，湖北巴氏染色液，直到染色明顯為止后，（染色時(shí)間長(zhǎng)短，依據(jù)染色液中的乙醇揮發(fā)程度及染色液染片數(shù)量和診斷醫(yī)生判讀標(biāo)準(zhǔn)而定；同時(shí)室內(nèi)溫度對(duì)染色效果及時(shí)間也有一定的影響。）取出后，用蒸餾水沖洗，除凈多余的染液；

4、用0.5～1%鹽酸乙醇分化數(shù)秒（使細(xì)胞片呈淡橙紅色）；再置于稀溶液中反藍(lán)約30秒，使細(xì)胞片呈藍(lán)色或紫藍(lán)色，然后用蒸餾水沖洗；

5、依次放入50%、80%的乙醇中各30秒，放入95%乙醇中脫水2分鐘；

6、用橘黃G染液（B液）染色1-2分鐘，取出，用95%乙醇清洗2次；

7、在95%乙醇中脫水2分鐘；

8、用EA50染液（C液)染6-8分鐘，取出于95%乙醇中洗兩次，各1分鐘；

9、用無水乙醇脫水，二中浸泡透吸1-2分鐘，使細(xì)胞及細(xì)胞核透明，然后用中性樹膠等封和蓋玻片封固，鏡檢。

細(xì)菌染色液的具體操作步驟：

　　1、涂片　　a、取一塊干凈的載玻片，平放，在載玻片中央滴一小滴生理鹽水?！　、用接種環(huán)無菌操作從瓊脂斜面上挑取適量菌苔?！　、將挑取的菌苔沾入載玻片中央生理鹽水中混勻并涂成薄膜。

　　2、干燥　　將涂好菌膜的載玻片平放在室溫下自然干燥。也可用電吹風(fēng)低溫吹干。

　　3、固定　　手持(木夾夾住)已干燥的涂有菌膜的載玻片，涂面朝上，在酒精燈火焰上通過2~3次?！　≡恚杭訜崾辜?xì)菌細(xì)胞的蛋白質(zhì)凝固，巴氏染色液采購，從而固定細(xì)菌細(xì)胞形態(tài)，并使之牢固附著在載玻片上。

　　4、染色　　將熱固定的細(xì)菌涂片平放于在載玻片架上，滴加染液于涂片上?！　∪旧珪r(shí)間：呂氏堿性美藍(lán)染色1~2min;復(fù)紅染色約1min;草酸銨結(jié)晶紫染色約1min。

　　5、水洗　　將細(xì)菌涂片上染液倒入廢液缸中；手持細(xì)菌染色涂片，置于廢液缸上方，用洗瓶中自來水沖洗涂片，直至流下的水無色為止。

　　6、干燥　　自然干燥：平放于室溫，自然干燥?！　〈蹈桑河秒姶碉L(fēng)冷風(fēng)或低溫?zé)犸L(fēng)吹干?！　∥桑浩椒旁谝粡埼埳?，上面覆蓋一張吸水紙，將細(xì)菌涂片兩面水分吸干。

通用名稱：H-E染色液

英文名稱：Hemotoxylin-Eosin solution

【預(yù)期用途】

適用于各種細(xì)胞、組織石蠟切片、冰凍切片、火膠棉切片、樹脂切片、涂片、印片的染色，用于臨床病理學(xué)輔助診斷。

【檢驗(yàn)原理】

細(xì)胞中的細(xì)胞核由帶負(fù)電荷的酸性物質(zhì)組成，與帶正電荷的堿性染料素的氧化物三氧化紅有較強(qiáng)的親和力；而細(xì)胞漿則相反，因含有帶正電荷的堿性物質(zhì)而與帶負(fù)電的酸性染料曙紅Y的親和力較強(qiáng)；細(xì)胞或組織切片經(jīng)HE染色后，細(xì)胞核被染成藍(lán)紫色，細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌纖維、膠原纖維、結(jié)締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色、粉紅色或橙紅色，與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對(duì)比，因此更易于觀察細(xì)胞或組織中正常成份和病變成份的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)。

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