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ELISA試劑盒——會出現(xiàn)的問題及解決辦法
吸光值均偏高(或線性不夠陡)。
a.原因:室溫太高(>25℃)。
解決辦法: 若無法降低室內(nèi)溫度,請適當(dāng)縮短步驟4的溫育時間。
b.原因:底物溶液受到污染。
解決辦法: 若發(fā)現(xiàn)底物溶液已呈現(xiàn)淡藍(lán)色,請不要再使用。
c.原因:反應(yīng)時間超過太久。
解決辦法:請控制反應(yīng)時間。
d.原因:酶標(biāo)記物污染了盒內(nèi)其它試劑。
解決辦法:使用過的吸頭應(yīng)立即丟棄,可避免試劑間相互污染,獸藥殘留ELISA試劑盒報價,凡是試劑(特別是酶標(biāo)記物與底物溶液)接觸過的容器應(yīng)立即清洗干凈。(先以漂白水浸泡,再以清水沖洗干凈,可確保無殘留)
ELISA試劑盒主要實驗原理
·包被:抗原或者能以物理性吸附于固相載體表面,原因是蛋白質(zhì)和聚乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,吸附之后能保持抗原反應(yīng)等活性;
·標(biāo)記:抗原或者可通過共價鍵與酶連接成酶結(jié)合物,獸藥殘留ELISA試劑盒哪家好,而此種酶結(jié)合物仍能保持其活性和酶的催化特點;
·顯色:酶結(jié)合物與相應(yīng)包被在固相載體的抗原或者結(jié)合后,獸藥殘留ELISA試劑盒,也被固定在固相載體上,加入酶的底物之后可出現(xiàn)顯色反應(yīng),根據(jù)反應(yīng)的顏色深淺可計算抗原或者的相對含量。
Elisa試劑盒實驗原理
將目標(biāo)包被于微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的結(jié)合,然后加入微生物化的目標(biāo),獸藥殘留ELISA試劑盒廠家,將未結(jié)合的生物素洗凈后,加入HRP標(biāo)記和親和素,再次洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
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