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熒光顯微鏡的標(biāo)本制作要求
1、載玻片
載玻片厚度應(yīng)在0.8~1.2mm之間,太厚的坡片, 一方面光吸收多,另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚集。載玻片必須光潔,厚度均勻,無(wú)明顯自發(fā)熒光。有時(shí)需用石英玻璃載玻片。
2、蓋玻片
蓋玻片厚度在0.17mm左右,光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光 ,也可用干涉蓋玻片,這是一種表面鍍有若干層對(duì)不同波長(zhǎng)的光起到不同干涉作用的物質(zhì)(如氟化鎂)的蓋玻片,它可以使熒光順利通過(guò),而反射激發(fā)光,熒光顯微鏡哪家好,這種反射的激發(fā)光可激發(fā)標(biāo)本。
3、標(biāo)本
組織切片或其他標(biāo)本不能太厚,若太厚激發(fā)光大部分消耗在標(biāo)本下部,而物鏡直接觀察到的上部不充分激發(fā)。另外,細(xì)胞重疊或雜質(zhì)掩蓋,影響判斷。
4、封裱劑
封裱劑常用甘油,必須無(wú)自發(fā)熒光,無(wú)色透明,熒光的亮度在pH8.5~9.5時(shí)較亮,不易很快褪去 。
5、鏡油
一般暗視野熒光顯微鏡和用油鏡觀察標(biāo)本時(shí),必須使用鏡油,盡量使用無(wú)熒光鏡油,也可用上述甘油代替,液體石蠟也可用,只是折光率較低,對(duì)圖像質(zhì)量略有影響。
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熒光顯微鏡的原理
熒光顯微鏡是一種較為常用的的光學(xué)顯微鏡,其基本原理是利用一定波長(zhǎng)的激發(fā)光對(duì)樣品進(jìn)行激發(fā),使之產(chǎn)生一定波長(zhǎng)的熒光,從而用于對(duì)樣品結(jié)構(gòu)或其組分進(jìn)行定性、定位、定量觀察檢測(cè)。
熒光顯微鏡是用短波長(zhǎng)的光線照射用熒光素染色過(guò)的被檢物體,使之受激發(fā)后而產(chǎn)生長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光,然后觀察。熒光顯微鏡廣泛應(yīng)用于生物,醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。
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熒光顯微鏡的工作原理
光源多采用200W的超高壓燈作光源,熒光顯微鏡,它是用石英玻璃制作,中間呈球形,熒光顯微鏡報(bào)價(jià),工作時(shí)由兩個(gè)電極間放電,引起蒸發(fā),球內(nèi)氣壓迅速升高,當(dāng)完全蒸發(fā)時(shí),可達(dá)50~70個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓力,這一過(guò)程一般約需5~15min。超高壓燈的發(fā)光是電極間放電使分子不斷解離和還原過(guò)程中發(fā)射光量的結(jié)果。它發(fā)射很強(qiáng)的紫外和藍(lán)紫光,足以激發(fā)各類熒光物質(zhì),熒光顯微鏡多少錢(qián),因此,為熒光顯微鏡普遍采用。
超高壓燈也散發(fā)大量熱能。因此,燈室必須有良好的散熱條件,工作環(huán)境溫度不宜太高。
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