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如果按支持材料形成的方式分,基于 scaffold 的培養(yǎng)體系可分為如下兩類,一種是將細(xì)胞分散在液體水凝膠中,然后通過交聯(lián)實(shí)現(xiàn) 3D 培養(yǎng),這類產(chǎn)品代表生產(chǎn)商包括 Cellendes, Matrigel, Glycosan Biosystems 和 QGel 等;另外一種是將細(xì)胞「播種“在 3D 基質(zhì)上,這類方法的代表廠商包括 3D Biotek, Alvetex 和 AlgiMatrix 等。第l一種方式中的 Cellendes 產(chǎn)品上面已經(jīng)做了簡要介紹
life 水凝膠中細(xì)胞的固定與標(biāo)記
使用小分子物質(zhì),例如熒光標(biāo)記 phalloidin,核酸染料,活性和毒性檢測試劑,增值檢測試劑等小分子物質(zhì)進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記方法,除了在孵育時(shí)間上適度延長以便能在水凝膠中充分?jǐn)U散外,與傳統(tǒng)的 2D 細(xì)胞培養(yǎng)方式相同。所培養(yǎng)的細(xì)胞如果經(jīng)基因修飾還有熒光蛋白,則可直接用于觀測,3D生物反應(yīng)器廠家,因凝膠完全透明不影響觀測結(jié)果。如果使用抗l體等大分子對(duì)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記則不能直接在水凝膠中開展,3D生物反應(yīng)器供應(yīng)商,因水凝膠的孔徑原因,不適合直接抗l體標(biāo)記,3D生物反應(yīng)器,需要使用 dextranase 將細(xì)胞從水凝膠中釋放出來,如果擔(dān)心細(xì)胞在操作過程中細(xì)胞生理活動(dòng)波動(dòng),則可經(jīng)在凝膠中將細(xì)胞固定后在進(jìn)行操作。
三維細(xì)胞培養(yǎng)的缺點(diǎn)與局限
三維細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)藥l物研發(fā)和毒性測試意義重大,但當(dāng)期也有一些問題尚待解決。總體上說,3D生物反應(yīng)器報(bào)價(jià),材料科學(xué)與生物學(xué)的結(jié)合使當(dāng)前 3D 培養(yǎng)方式越來越多樣化,用戶的選擇空間很大,可在比較中找到很適合自己的方法。眾多的 3D 培養(yǎng)方法重點(diǎn)關(guān)注如何讓 3D 體系更加接近人體實(shí)際環(huán)境,而對(duì)藥l物研發(fā)企業(yè),他們除了模擬實(shí)際環(huán)境,還要求高l效、自動(dòng)化,使用成本大大降低。
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