RCCS轉(zhuǎn)壁式生物反應(yīng)器在細(xì)胞增值技術(shù)中的應(yīng)用！

細(xì)胞增殖檢測技術(shù)

       目前主要有兩種用于檢測細(xì)胞增殖能力的方法。一種是直接的方法，通過直接測定進(jìn)行分裂

       的細(xì)胞數(shù)來評價(jià)細(xì)胞的增殖能力。另一種是間接的方法，即細(xì)胞活力（cell viability）檢測方法，通過檢測樣品中健康細(xì)胞的數(shù)目來評價(jià)細(xì)胞的增殖能力。顯然，自動(dòng)灌注式細(xì)胞培養(yǎng)，細(xì)胞活力檢測法并不能終證明檢測樣品中的細(xì)胞是否在增殖。如細(xì)胞在某一培養(yǎng)條件下會自發(fā)啟動(dòng)凋亡程序，但的干擾可抑制凋亡的發(fā)生；這時(shí)若采用細(xì)胞活力檢測法，可重復(fù)灌注式細(xì)胞培養(yǎng)，顯然可以區(qū)分兩種條件下的細(xì)胞數(shù)量，但我們并不能從干擾組細(xì)胞數(shù)大于對照組的事實(shí)說明可促進(jìn)細(xì)胞增殖的結(jié)論。所以直接的證據(jù)應(yīng)該采用方法一。

其中常見檢測：CCK8檢測法 ，MTT檢測法，Brdu檢測法，Edu檢測法，平板克X隆形成。

這是否是轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)？

      轉(zhuǎn)瓶包含一個(gè)縱軸封瓶以及周圍包裹的彈性塑料壁。在這種情況下，氣體運(yùn)輸是通過瓶頸。并且，轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)的目的不是三維培養(yǎng)，而是二維培養(yǎng)。培養(yǎng)物沿著瓶壁生長，并且，當(dāng)瓶轉(zhuǎn)動(dòng)，培養(yǎng)物就會與媒介接觸。因此，這兩個(gè)系統(tǒng)之間沒有相似性(參見問題1RCCS生物反應(yīng)器的工作原理)。

當(dāng)我想在微載體珠上培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，在我裝載它們進(jìn)去反應(yīng)器之前細(xì)胞是否需要附在微珠？

      微珠和細(xì)胞可以同時(shí)被裝載入反應(yīng)器，但又獨(dú)立彼此。在它們兩個(gè)被裝載入反應(yīng)器之后在反應(yīng)器里面的細(xì)胞就會自動(dòng)地附著微珠。

使用微重力生物反應(yīng)器時(shí)需要一個(gè)恒溫箱嗎？

      是的，恒溫箱是為了保持培養(yǎng)的溫度，pH值，氧氣供給量。應(yīng)當(dāng)注意水是從硅酮氧合器蒸發(fā)到恒溫箱的。這個(gè)將導(dǎo)致培養(yǎng)皿中產(chǎn)生氣泡。所以，為了保持水蒸氣的濃度，防止在培養(yǎng)容器中的蒸發(fā)，灌注式細(xì)胞培養(yǎng)，恒溫箱里的濕度也是很重要的。

原代培養(yǎng)細(xì)胞與體內(nèi)原組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上相似性大，是檢測很好的實(shí)驗(yàn)對象，永生化細(xì)胞株也是從原代1開始的，但導(dǎo)入了病毒增殖基因等，跟原代是不同的，而且“50代（大概的）以前的細(xì)胞和之后的細(xì)胞比較，之后的遺傳物質(zhì)已經(jīng)改變，旋轉(zhuǎn)灌注式細(xì)胞培養(yǎng)，并不再具有接觸生長抑制現(xiàn)象。這些細(xì)胞帶有ai變細(xì)胞的特點(diǎn)“。在養(yǎng)原代細(xì)胞和永生性細(xì)胞株的過程中發(fā)現(xiàn)，永生細(xì)胞株形態(tài)及整理狀態(tài)不如原代，但可以相對長時(shí)間傳代，而原代有代數(shù)限制，這是永生細(xì)胞株的一大優(yōu)勢。原代細(xì)胞具有著可持續(xù)傳代；生物性狀發(fā)生變化；仍保留親體組織的遺傳特征；接近和反映體內(nèi)生理特征等優(yōu)勢。

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