真空干燥箱顧名思義就是在一個可以制造出真空與高溫的空間，高溫呢，井式爐批發(fā)，就是用電加熱產(chǎn)生高溫即可，這個比較容易理解，那"真空度”顧名思義就是真空的程度.是真空泵、微型真空泵、微型氣泵、微型抽氣泵、微型抽氣打氣泵等抽真空設(shè)備的一個主要參數(shù).所謂"真空"，是指在給定的空間內(nèi)，壓強低于101325帕斯卡(也即一個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓強約101KPa)的氣體狀態(tài)。在真空狀態(tài)下，氣體的稀薄程度通常用氣體的壓力值來表示，顯然，該壓力值越小則表示氣體越稀薄。

(1) 根據(jù)試驗要求，制備枯草黑色變種芽孢懸液和芽孢樣片。

(2) 每次試驗取 2 個菌片為一組，平放于無菌平皿內(nèi)，勿重疊。加蓋，分置于滅菌柜的各層，內(nèi)、中、外不同部位。試驗時，滅菌柜內(nèi)片樣本外，還應(yīng)滿載以模擬的常規(guī)處理物品。

(3) 關(guān)閉柜門，開啟電源，按滅菌柜設(shè)計程序進行滅菌。滅菌完畢，取出平皿，將菌片取出接種于含 5.0ML 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基試管中，置 37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)作定性培養(yǎng)。72 H 后觀察結(jié)果。

肉湯管混濁者表示有菌生長， 判為陽性; 肉湯管澄清者表示無菌生長， 繼續(xù)培養(yǎng)至第 7 D， 若仍無菌生長，判為陰性。

對難以判定的肉湯管，取其中 0.2ML 懸液接種營養(yǎng)瓊脂平板，用滅菌 L 棒涂佈均勻，置 37℃ 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。48 H 后涂片染色，在顯微鏡下觀察菌落形態(tài)，或進一步做其他試驗，以判斷生長者是否為試驗菌。若有非試驗菌污染，應(yīng)查找原因重新進行試驗。

(4) 測試中，應(yīng)同時設(shè)立定性和定量陽性對照組(菌片對照)與陰性對照組(培養(yǎng)基對照)。

(5) 定量陽性對照組，以同批試驗用菌片放在室溫下，待試驗組滅菌接種后，立即將該菌片 2 片分別移入含 5.0ML PBS試管中，各振蕩 80次洗滌。進行活菌培養(yǎng)計數(shù)。

(6) 定性陽性對照組，以同批試驗用菌片放在室溫下，待試驗組滅菌接種后，立即將試驗菌片 2 片，分別接種于 5.0ML 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱中作定性培養(yǎng)，觀察有細(xì)菌生長情況。

(7) 陰性對照組，以空白樣片 2 片，分別接種于 5.0ML 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，同時將未接種過的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中作定性培養(yǎng)，觀察有無細(xì)菌生長。

(8) 試驗重復(fù) 5 次。

(9) 在 5 次試驗中，每次試驗中陽性對照菌片的回收菌量均應(yīng)達5×`10^5` CFU/片～5×`10^6`CFU/片；定性陽性對照組，細(xì)菌生長良好；陰性對照應(yīng)無菌生長。陽性或陰性對照若有不符合上述要求的結(jié)果，試驗作廢，重新進行。

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