色譜法,又稱層析法。根據(jù)其分離原理,有吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜與排阻色譜等方法。吸附色譜是利用吸附劑對被分離物質(zhì)的吸附能力不同,用溶劑或氣體洗脫,以使組分分離。常用的吸附劑有氧化鋁、硅膠、聚酰胺等有吸附活性的物質(zhì)。分配色譜是利用溶液中被分離物質(zhì)在兩相中分配系數(shù)不同,以使組分分離。其中一相為液體,涂布或使之鍵合在固體載體上,稱固定相;另一相為液體或氣體,稱流動相。常用的載體有硅膠、硅藻土、硅鎂型吸附劑與纖維素粉等。離子交換色譜是利用被分離物質(zhì)在離子交換樹脂上的離子交換勢不同而使組分分離。常用的有不同強度的陽、陰離子交換樹脂,流動相一般為水或含有的緩沖液。排阻色譜又稱凝膠色譜或凝膠滲透色譜,是利用被分離物質(zhì)分子量大小的不同和在填料上滲透程度的不同,以使組分分離。常用的填料有分子篩、葡聚糖凝膠、微孔聚合物、微孔硅膠或玻璃珠等,可根據(jù)載體和試樣的性質(zhì),選用水或為流動相。
近幾十年色譜作為一種強大的分離技術與MS等檢測手段的聯(lián)用得到了極大的發(fā)展,GC-MS,HPLC-MS等在檢測,食品安全分析等方面應用廣泛,是成熟的分析方法。色譜法的應用可以根據(jù)目的分為制備性色譜和分析性色譜兩大類。制備性色譜的目的是分離混合物,獲得一定數(shù)量的純凈組分,這包括對有機合成產(chǎn)物的純化、天然產(chǎn)物的分離純化以及去離子水的制備等。相對于色譜法出現(xiàn)之前的純化分離技術如重結(jié)晶,色譜法能夠在一步操作之內(nèi)完成對混合物的分離,但是色譜法分離純化的產(chǎn)量有限,只適合于實驗室應用。

如何預防液相色譜儀液相泵的故障: 要保持泵的良好操作性能,制備液相,必須維護系統(tǒng)的清潔,保證溶劑和試劑的質(zhì)量,對流動相進行過濾和脫氣.下面列出預防泵故障的幾項措施: 1、用高質(zhì)量試劑和HPLC級溶劑; 2、過濾流動相和溶劑; 3、脫氣; 4、每天開始使用時放空排氣,工作結(jié)束后從泵中洗去緩沖液; 5、不讓水或腐蝕性溶劑滯留泵中; 6、定期更換墊圈; 7、需要時加潤滑油; 8、查閱有關泵操作手冊中的其它建議?! √幱诹己貌僮鳡顟B(tài)的泵,應該能使色譜圖上的基線平穩(wěn);保留時間的重復性好。在等度洗脫時壓力波動小于2%。梯度洗脫時壓力變化應是緩慢和平穩(wěn)的。 為了使故障發(fā)生后盡除,平時應常備密封、單向閥、泵頭裝置、各式接頭、保險絲等部件,以及更換工具。
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