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有效使用小型發(fā)酵罐以及發(fā)酵變化
如何有效使用小型發(fā)酵罐以及發(fā)酵過程的變化,如何我們經(jīng)常使用到小型發(fā)酵罐來做各種科研實驗,那么在操作中得到很好的利用是一個非常重要的課題,還有在發(fā)酵的過程中一些細(xì)微的變化。
小型發(fā)酵罐分批培養(yǎng)過程中大腸桿i菌的菌體生長狀況,通過控制發(fā)酵過程的溫度、溶氧、攪拌速度、空氣流量、泡沫水平等參數(shù),并每小時取樣測OD值和還原糖量,制作菌體生長曲線,以此判斷大腸桿i菌的生長發(fā)酵狀況。結(jié)果表明大腸桿i菌在發(fā)酵的前三個小時處于生長延遲期,發(fā)酵3~6小時為對數(shù)生長期,發(fā)酵6小時后該菌開始進(jìn)入平衡期,第8小時時結(jié)束發(fā)酵實驗。
發(fā)酵罐是進(jìn)行液體發(fā)酵的特殊設(shè)備。生產(chǎn)上使用的發(fā)酵罐容積大,均用鋼板或不銹鋼板制成;供實驗室使用的小型發(fā)酵罐,其容積可從約1L至數(shù)百升或稍大些。一般來說,5L以下是用耐壓玻璃制作罐體,10 L以上用不銹鋼板或鋼板制作罐體。發(fā)酵罐配備有控制器和各種電極,可以自動地調(diào)控試驗所需要的培養(yǎng)條件,是微生物學(xué)、遺傳工程、醫(yī)i藥工業(yè)等科學(xué)研究所必需的設(shè)備。
在當(dāng)今市場上,各廠家生產(chǎn)的發(fā)酵罐會有所差別,但基本原理是相同的,基本結(jié)構(gòu)是類似的。本實驗使用的是BIOTECH-7BGZ發(fā)酵罐,其結(jié)構(gòu)主要又罐體和控制器兩大部分組成,罐體為一硬質(zhì)玻璃圓筒,底和頂兩端用不銹鋼板及橡膠墊圈密封構(gòu)成,容積為5L,頂蓋上有多個孔口,分別是加料及接種口補(bǔ)料口、放置 DO(溶解氧)電極口、放置pH電極口、放置消泡電極口、放置取樣管口等;本罐可配置不同性能的控制器,控制器能完成基本的功能。
發(fā)酵罐通氣裝置的作用是什么?
近年來由于發(fā)酵罐容積的增大,為了保證攪拌系統(tǒng)的穩(wěn)定運行,在罐底設(shè)置了底軸承,因而占去了空氣管的位置,為了使空氣分布仍據(jù)中央,提出了將空氣管在罐內(nèi)分散成3~4個口,細(xì)菌發(fā)酵罐,使其均勻分布在罐中央附近的設(shè)計方案。
通氣裝置是指將無菌空氣導(dǎo)入培養(yǎng)基中的裝置,簡單的通氣裝置是一單孔管,單孔管的出口位于罐的中央,開口向下,以免培養(yǎng)基中固體物質(zhì)在開口處堆積和罐底固形物質(zhì)沉淀。有人曾建議采用多孔環(huán)管作為發(fā)酵罐的通氣裝置,但由于發(fā)酵過程通氣量較大氣泡直徑與通氣量和攪拌有關(guān),山分布器的孔徑關(guān)系,在強(qiáng)烈攪拌下,實驗證明多孔分布器對氧的傳遞效果并不比單孔管為好,相反還會造成不必要的壓力損失及小孔堵塞的麻煩,故不宜采用。
重視閥門上密封檢查
如果截止閥的閥桿和閥體內(nèi)孔的加工質(zhì)量不好,或因長期使用導(dǎo)致磨損而使填料與閥桿的配合間隙增大,都會導(dǎo)致介質(zhì)由閥桿處泄漏,這種現(xiàn)象被稱為閥門“上密封泄露”。然而,在發(fā)酵生產(chǎn)中,閥門的上密封檢查經(jīng)常被忽視。2003年,閥門的上密封泄漏事故就曾使新疆某蟲草發(fā)酵車間連續(xù)1個月染菌倒罐,企業(yè)經(jīng)濟(jì)損失很大。因此,對發(fā)酵用的閥門不僅要重視密封副結(jié)構(gòu)的泄漏,更要重視上密封泄漏。
在發(fā)酵生產(chǎn)中,由于發(fā)酵工藝的要求,一些閥門并不是按流體流向安裝的,如在一些發(fā)酵罐中,取樣閥門是靠近發(fā)酵罐的第i一閥門,為了在取樣前對該閥門進(jìn)行滅菌,閥門的安裝和發(fā)酵液流向是相反的,這樣才能在取樣閥底部加裝一個小的附加閥門使蒸汽流通。該取樣閥的上密封結(jié)構(gòu)的密封要求非常高,否則發(fā)酵液可能滲入該取樣閥的上密封結(jié)構(gòu)中甚至從上密封結(jié)構(gòu)中泄漏,從而造成發(fā)酵染菌。
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