CFSE是一種可穿透細(xì)胞膜的熒光染料，具有細(xì)胞膜通透性，能夠自由進(jìn)入細(xì)胞；當(dāng)CFSE擴(kuò)散穿過細(xì)胞膜，抗體稀釋液批發(fā)，會(huì)與細(xì)胞內(nèi)源酯酶產(chǎn)生水解反應(yīng)而被激發(fā)，發(fā)出綠色熒光，這些帶熒光的CFSE會(huì)進(jìn)一步與細(xì)胞骨架蛋白結(jié)合，形成穩(wěn)定的胞內(nèi)熒光蛋白。每當(dāng)細(xì)胞進(jìn)行分裂增殖，胞內(nèi)熒光蛋白會(huì)被平均分配到下一代細(xì)胞中，因此細(xì)胞熒光強(qiáng)度會(huì)隨著增殖代數(shù)增加而不斷地降低，可用流式細(xì)胞儀進(jìn)一步偵測(cè)分析得出細(xì)胞分裂增殖的情況。CFSE的濃度，對(duì)于終判斷細(xì)胞增殖結(jié)果有直接性的影響！

如何避免細(xì)胞抱團(tuán)？細(xì)胞生長(zhǎng)密度不要太高，70%－80％就好（細(xì)胞剛剛基本成單層細(xì)胞，沒有出現(xiàn)成層生長(zhǎng)），這樣細(xì)胞抱團(tuán)的幾率就大大減少了。如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)成集落，可先將細(xì)胞低密度傳代，第二天再消化傳代，這樣連續(xù)傳三次，細(xì)胞抱團(tuán)的就越來越小，這樣幾代過后，再按照常規(guī)消化方法和時(shí)間能將細(xì)胞逐漸傳成單個(gè)的。用無鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細(xì)胞。

細(xì)胞培養(yǎng)常見的支原體污染為6種： 發(fā)酵支原體(M.fermentans)，唾液支原體(M.salivarum)，福建抗體稀釋液，口腔支原體(M.orale)，抗體稀釋液公司，精氨酸支原體(M.arginini)，抗體稀釋液出售，豬鼻支原體(M.hyorhinis)，萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)等，有些是動(dòng)物來源，有些是人來源，支原體沒有細(xì)胞壁，所以使用破壞細(xì)胞壁類藥不具效用，建議使用專為支原體開發(fā)的處理試劑保護(hù)您珍貴的細(xì)胞。

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