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細(xì)胞衰老的常見(jiàn)表現(xiàn):1.細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢 :細(xì)胞周期緩滯或是停滯都是衰老細(xì)胞的基本特征,此時(shí)細(xì)胞周期主要停滯于G1期。2.表面分泌物會(huì)增多:細(xì)胞衰老時(shí)顯微鏡下可見(jiàn)小黑點(diǎn),但是小黑點(diǎn)增加,雙抗公司,也有可能與培養(yǎng)條件如pH,生物污染等有關(guān)。3.細(xì)胞形態(tài)改變:如細(xì)胞體積增大、細(xì)胞扁平、胞核與核仁體積增加,如果是貼壁細(xì)胞,其細(xì)胞表面會(huì)明顯觀察到比較臟,運(yùn)用常規(guī)HE染色結(jié)果會(huì)發(fā)現(xiàn),細(xì)胞表面有很多附著的臟物,細(xì)胞形態(tài)與剛開(kāi)始培養(yǎng)的細(xì)胞外觀明顯不同,雙抗哪家好,像是上皮細(xì)胞等可能會(huì)出現(xiàn)很多梭狀形態(tài),且細(xì)胞質(zhì)突起等形狀異常細(xì)胞。
在生物反應(yīng)器中生產(chǎn)需要對(duì)懸浮的生產(chǎn)細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)。多個(gè)用于生產(chǎn)慢病毒的細(xì)胞系(293T、293FT、293SF-3F6)被報(bào)道易于在化學(xué)成分限定的培養(yǎng)基(Freestyle 293 and F17, Invitrogen, Carlsbad, CA; HyQSFM4TransFx293,雙抗出售, Hyclone, Logan, UT)中適應(yīng)懸浮培養(yǎng)。這些細(xì)胞可以在沒(méi)有為載體的情況下迅速懸浮生長(zhǎng),這使得它們的培養(yǎng)和擴(kuò)大比貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞容易很多。此外,培養(yǎng)基中沒(méi)有其他動(dòng)物來(lái)源的組分是臨床生產(chǎn)合適的情況,它可以降低被外源物質(zhì)污染的風(fēng)險(xiǎn)。
Dulbecco’s Modified Eagle Medium(DMEM)是目前常使用的改良式Eagle"s培養(yǎng)基。DMEM與MEM含有相同的營(yíng)養(yǎng)成分,但濃度高出2~4倍。主要用于快速生長(zhǎng)的細(xì)胞,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)兩種。DMEM含更高濃度的NaHCO3,要用10%的CO?來(lái)平衡,漳州雙抗,當(dāng)然也可以在較低CO?濃度下使用。DMEM-高糖(標(biāo)準(zhǔn)型)更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來(lái)生長(zhǎng)點(diǎn)的培養(yǎng),也可用于雜交瘤中瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。
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