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血清中可能出現(xiàn)的沉淀物是什么?
基于多年的實(shí)驗(yàn)研究,福州抗體哪家好,用于細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清以及其它血清中可能會(huì)存在以下種類(lèi)的沉 淀物:(1)纖維蛋白,它是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物,可以達(dá)到 1-2mm,可以用肉眼觀(guān)察到。 因?yàn)檠宥际窃诘蜏叵逻M(jìn)行收集和快速處理的,一些纖維蛋白原(可溶性的形成絮狀纖維蛋白 的前體)在處理過(guò)程中仍然處于溶解狀態(tài),當(dāng)經(jīng)過(guò)zui后的過(guò)濾分裝后,福州抗體出售,就會(huì)在瓶中凝結(jié)出現(xiàn)纖 維蛋白沉淀。(2)磷酸鈣,它也是常見(jiàn)的一種沉淀物,通常會(huì)使血清出現(xiàn)渾濁,并且在 37℃ 培養(yǎng)的時(shí)候會(huì)增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀(guān)察像小黑點(diǎn),這些小黑點(diǎn)由于布朗運(yùn)動(dòng)看上去可以活動(dòng),因此經(jīng)常被誤認(rèn)為是微生物污染。(3)膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì)。他們 也是血清中出現(xiàn)沉淀物的常見(jiàn)原因。
如何避免血清中沉淀物的出現(xiàn)?
首先要注意正確的血清解凍步驟,而且溶解過(guò)程中一定要每隔一段時(shí)間均勻而緩慢的搖動(dòng)血清。我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在下列情況下沉淀物可能增加,使用中應(yīng)該盡量避免:(1)熱滅huo血清;(2)在 37℃下培養(yǎng)血清;(3)反復(fù)凍融;(4)γ射線(xiàn)照射;(5)長(zhǎng)期儲(chǔ)存在 2-8℃;(6)在室溫下放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。
如何去除血清中的沉淀?
如想去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝到無(wú)菌離心管中,福州抗體,以 400g 離心,上清液即可直接加入到培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。注意:不要以過(guò)濾的方式去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)檫@可能阻塞濾膜。
胎牛血清使用方法:在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清,福州抗體批發(fā),常使用的澳洲胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜,影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中使用10%的澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞,效果非常好。但是有些細(xì)胞也會(huì)使用5%的Gibco FBS或者20%的澳洲胎牛血清,要根據(jù)具體 細(xì)胞選擇合適的澳洲胎牛血清濃度。
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