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什么是分光分度計(jì)
分光光度計(jì),又稱光譜儀(spectrometer),是將成分復(fù)雜的光,分解為光譜線的科學(xué)儀器。測(cè)量范圍一般包括波長(zhǎng)范圍為380~780nm的可見光區(qū)和波長(zhǎng)范圍為200~380nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的380~780nm波長(zhǎng)的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見光分光光度計(jì)的光源。
分光分度計(jì)的組成部分
儀器組成
分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。
儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測(cè)器、信號(hào)處理器和顯示與存儲(chǔ)系統(tǒng)組成。
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分光光度計(jì)的關(guān)鍵參數(shù)有哪些
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選擇可見和紫外可見的分光光度計(jì)所關(guān)注的*關(guān)鍵的指標(biāo)有三點(diǎn):一是波長(zhǎng)范圍,二是波長(zhǎng)準(zhǔn)確度,三是雜散光參數(shù)。波長(zhǎng)范圍的選擇是由用戶實(shí)驗(yàn)需要所定,全波長(zhǎng)紫外分光光度計(jì)多少錢,波長(zhǎng)范圍越寬的價(jià)格越貴;波長(zhǎng)準(zhǔn)確度及雜散光參數(shù)的數(shù)值越低,表示性能越好。
影響顯色反應(yīng)的主要因素
(1)顯色劑用量:通過實(shí)驗(yàn)來確定*適用量;
(2)反應(yīng)液的酸堿度(pH)溶液酸堿度直接影響金屬離子與顯色劑存在形式以及有色化合物組成的穩(wěn)定性;
(3)反應(yīng)溫度:不同的顯色反應(yīng)需要不同的反應(yīng)溫度,一般顯色反應(yīng)可在室溫下完成;
(4)顯色反應(yīng)時(shí)間:顯色反應(yīng)的速度有快有慢;
(5)干擾離子的影響:應(yīng)采用適當(dāng)方法消除其影響;
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