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全自動(dòng)核酸提取儀如何操作呢?
核酸提取儀配套試劑及其操作步驟,買了儀器后一定要考慮后續(xù)使用配套試劑的問題:
1)配套試劑是否齊全。不同樣本類型的提取試劑盒產(chǎn)品鏈?zhǔn)欠裢暾?/p>
2)配套試劑是不是預(yù)封裝。非預(yù)封裝的試劑需要實(shí)驗(yàn)員用移液器加入裂解液、洗滌液和洗脫液等試劑,并沒有減少人工操作時(shí)間;
3)提取前除了加樣本外。是否需要添加蛋白酶K,由于有些公司并沒有掌握裂解液中預(yù)封裝蛋白酶K且常溫儲(chǔ)存的技術(shù),蛋白酶K需要-20℃單獨(dú)保存,需即用即加。每個(gè)樣本多加一步蛋白酶K,96個(gè)樣本多了10~15min左右的操作時(shí)間。
4)配套試劑的保存溫度。有些廠家的提取試劑需要在2—8℃運(yùn)輸保存,冷鏈運(yùn)輸增加運(yùn)輸成本,保存需要在冰箱中,而預(yù)封裝提取試劑體積較大,在用量大特別像新冠這樣大批量的使用,完全沒有足夠冰箱可以進(jìn)行一段時(shí)間試劑的儲(chǔ)存空間。
5)提取后的擴(kuò)增效率。提取核酸時(shí)觀察磁珠殘留率并且檢測提取核酸質(zhì)量!
全自動(dòng)核酸提取儀詳細(xì)介紹
全自動(dòng)核酸提取儀,是運(yùn)用搭配的核苷酸提取實(shí)驗(yàn)試劑來自動(dòng)進(jìn)行樣版核苷酸的提取工作中的儀器設(shè)備,核酸提取儀分成兩大類:一類是大中型的自動(dòng)化的,一般稱之為自動(dòng)液態(tài)工作站;另一類是中小型自動(dòng)核酸提取儀,利用封裝好的配套設(shè)施實(shí)驗(yàn)試劑自動(dòng)進(jìn)行提取提純?nèi)^程。大中型自動(dòng)液態(tài)工作站由于機(jī)器設(shè)備成本費(fèi)昂貴,運(yùn)作成本增加,合適一次提取好幾千個(gè)同一類型標(biāo)本采集,全自動(dòng)核酸提取儀器,因此 真真正正獲得使用的非常少;而中小型自動(dòng)化的儀器設(shè)備,由于實(shí)驗(yàn)儀器和運(yùn)作低成本,全自動(dòng)核酸提取儀器生產(chǎn)廠家,實(shí)際操作便捷獲得很多的運(yùn)用。
全自動(dòng)核酸提取儀——類型介紹
磁珠法自動(dòng)核酸提取儀又分為磁棒法和抽吸法
先說抽吸法:顧名思義,抽吸法就是通過自動(dòng)移液裝置來進(jìn)行,通過自動(dòng)移液裝置來加入裂解液、磁珠吸附;抽走裂解液,加入漂洗液,磁珠吸附,抽走漂洗液,加入洗脫緩沖液。從步驟上好像沒什么問題,但是抽吸法的問題在于,為了在去除廢液的時(shí)候不抽走磁珠,移液器不能靠磁珠太近,全自動(dòng)核酸提取儀器報(bào)價(jià),以防磁珠連同廢液被抽掉,這樣每一次抽廢液的時(shí)候總有一小部分不能完全的抽走,特別是磁鐵在底部的裝置,因?yàn)榇胖楸淮盆F吸附在底部,所以移液器不能靠底部太近,這樣漂洗液就不能完全去除,殘留的漂洗液中的鹽和乙醇會(huì)影響后面的洗脫效率和PCR成功率;磁鐵在側(cè)面的裝置殘留的液體會(huì)少些,但是洗脫的效率也不好,依靠DNA自行溶解到洗脫緩沖液中,除非等上半小時(shí)以上,所以有些96自動(dòng)核酸提取工作站,提取一輪的時(shí)間需要150分鐘,32磁棒法的同樣的時(shí)間可以提5輪了。
再說磁棒法核酸提取儀:通量通常有8、16、32、96通道,相對(duì)于抽吸法,磁棒法的優(yōu)點(diǎn)是每一步的液體不殘留,因?yàn)榇虐糁粠ё叽胖椋D(zhuǎn)移到下一個(gè)步驟相應(yīng)的反應(yīng)孔中,另外選擇磁棒法的提取儀器盡量要功能更齊全的,比如可以加熱,每個(gè)加熱槽獨(dú)立溫控,這樣可以設(shè)置加熱、裂解、洗脫的不同溫度,全自動(dòng)核酸提取儀器多少錢,另外很重要的一點(diǎn)是,帶動(dòng)磁棒的電機(jī)要能帶動(dòng)磁棒進(jìn)行液體的快速混勻和攪拌,這樣才有利于自動(dòng)化和有助于裂解和漂洗。磁棒法的通量選擇盡量是32通道,96通道的看似通量更高,但是有個(gè)很現(xiàn)實(shí)的問題,96個(gè)磁力棒在從一個(gè)板轉(zhuǎn)移至另外一個(gè)板的時(shí)候,磁力棒上面的液體中途滴下來怎么辦,它會(huì)滴到別的孔中造成污染,而32通道的磁力棒運(yùn)行軌跡不經(jīng)過其他樣本的上空,這樣不會(huì)交叉污染。
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