全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)的提

菌株的鑒定：對(duì)篩選得到的乳酸菌進(jìn)行16S rDNA序列分析，確定其種屬。將活化好的菌液，進(jìn)行菌株的全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)的提取[16]，然后對(duì)基因組DNA的16S rDNA區(qū)域進(jìn)行PCR擴(kuò)增，上游引物27F序列5′-AGAGTTTGATCCTGGCCTCA-3′，下游引物1492R序列：5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′，擴(kuò)增片段為1 500 bp。PCR體系50 μL：10×buffer 5 μL；脫氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate, dNTP) 5 μL；上游引物(25 μmol/L)0.5 μL；下游引物(25 μmol/L)0.5 μL；Taq DNA 聚合酶(250 U)0.5 μL；模板DNA 1.5 μL ；誘導(dǎo)植株3個(gè)防衛(wèi)反應(yīng)基因PR-1a、PR-1b、PAL和1個(gè)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因NPR1的超量表達(dá)，并在處理24h后達(dá)到值，顯著降低條斑病菌對(duì)水稻植株的侵染。ddH2O 37 μL。PCR擴(kuò)增條件為：95 ℃ 3 min；95 ℃ 10 s；55 ℃ 30 s；72 ℃ 1 min；72 ℃ 5 min，2～4反應(yīng)步驟進(jìn)行30個(gè)循環(huán)。擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)其純度及濃度，將達(dá)到測(cè)序要求的擴(kuò)增產(chǎn)物送至上海華大基因進(jìn)行測(cè)序，將測(cè)序結(jié)果在美國(guó)國(guó)立生物技術(shù)信息中心(national center for biotechnology information, NCBI)上BLAST進(jìn)行比對(duì)，并確定其種屬。

解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaci

解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）為芽孢桿菌屬，是一種與枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）親緣性很高的細(xì)菌。該菌為革蘭氏陽(yáng)性、兼性厭氧的桿狀細(xì)菌；在自然界中分布廣泛，不但可在土壤、植物根際體表、深海水等外界環(huán)境中存在，同時(shí)在植物體內(nèi)也很常見；其適生長(zhǎng)溫度為28～30℃，適宜生長(zhǎng)的pH6．5～7。 解淀粉芽孢桿菌的菌落在L-B培養(yǎng)基和牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上呈淡黃色不透明狀，表面粗糙，有隆起，邊緣不規(guī)則。在實(shí)際生產(chǎn)過程中菌株的挑選，培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)細(xì)節(jié)等都會(huì)影響菌的數(shù)量及代謝產(chǎn)物的分泌，不適宜的培養(yǎng)條件和配方，會(huì)導(dǎo)致菌株生長(zhǎng)不良，胞外活性產(chǎn)物代謝量減少，這也是現(xiàn)階段市場(chǎng)上眾多“解淀粉芽孢桿菌”產(chǎn)品下效果參差不齊的主要原因。因此，在生產(chǎn)發(fā)酵過程中，應(yīng)有針對(duì)性地對(duì)培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)、溫度、轉(zhuǎn)速及培養(yǎng)基pH值、接菌量、供氧量，光照等因素調(diào)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格把控。解淀粉芽孢桿菌（Bacillusamyloliquefaciens）是具有廣譜抗病作用的生。

解淀粉芽孢桿菌生物制劑

解淀粉芽孢桿菌Bacillus amyloliquefaciens (Fukumoto) Priest是一種嗜溫、好氧、產(chǎn)芽孢的桿狀細(xì)菌，革蘭氏陽(yáng)性，其生理特征多樣，在自然界中廣泛存在，對(duì)人畜無毒無害，不污染環(huán)境。在其生長(zhǎng)過程中可以產(chǎn)生多種次生代謝產(chǎn)物和酶類，具有抑制病原真菌、細(xì)菌和病毒活性的能力。Sutyak等[22]從益生菌乳制品中分離得到1株解淀粉芽孢桿菌，其細(xì)胞的無菌上清液可以對(duì)單核細(xì)胞增生李斯特菌、鏈球菌屬及腸道加德菌產(chǎn)生抑菌作用，而對(duì)腸道乳酸桿菌不產(chǎn)生作用。

解淀粉芽孢桿菌生物制劑是以解淀粉芽孢桿菌為有效菌，經(jīng)發(fā)酵和超濾濃縮膜分離加工技術(shù)制成的微生物菌劑。具有適應(yīng)性強(qiáng)、活性高、內(nèi)生傳導(dǎo)的特點(diǎn)，通過營(yíng)養(yǎng)和空間位點(diǎn)的競(jìng)爭(zhēng)、拮抗作用、溶菌作用，能抑制多種病原微生物生長(zhǎng)，并具有促進(jìn)作物生長(zhǎng)、改善農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)、提高、改善農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境等作用。產(chǎn)品理化性質(zhì)及質(zhì)量控制指標(biāo):該產(chǎn)品生產(chǎn)是通過微生物（解淀粉芽孢桿菌生Lx-11）生物發(fā)酵獲得，解淀粉芽孢桿菌分散在發(fā)酵培養(yǎng)液中，為發(fā)酵后直接利用。