等溫核酸試劑盒

檢測方法

1電泳檢測

2熒光檢測

3側(cè)向流試紙條檢測

DNA R&D KITTwistAmp Basic酶和必要試劑

客戶提供引物和模板Twirla

TwistAmp exo

適用于real-time熒光探針檢測Twista,T16

TwistAmp nfo（核酶）

適用于末端三明治法檢測DNA擴增反應側(cè)向流試紙方法

Twirla

試劑盒

自PCR技術(shù)誕生以來已經(jīng)有三十年了。從經(jīng)典PCR、實時定量PCR再到現(xiàn)在的數(shù)字PCR，這一技術(shù)在不斷蛻

變卻從未淡出我們的視野。近年來，等溫擴增技術(shù)的興起無疑是對PCR的巨大挑戰(zhàn)。

等溫擴增技術(shù)的基因快速診斷方法,涉及生物檢測技術(shù)領(lǐng)域,具體是用體外生物檢測試劑快速檢測病原微

生物的一種技術(shù)。

包括如下步驟:一、對被檢樣品進行預處理;二、包括目標靶基因數(shù)據(jù)庫的建立;生物信息學的分析比較;

基因組多態(tài)性的分型處理和簡并堿基的運用,獲得各種靶基因的特異性引物兩對,分別與靶基因中的六個

獨立區(qū)域序列特異性匹配;三、進行等溫擴增反應;四、分析判斷結(jié)果。該方法的優(yōu)點:不需特殊試劑與

設(shè)備;高特異性;.靈敏度高;鑒定簡便;用途廣: 可用于食品、藥品、化妝品等領(lǐng)域的質(zhì)量控制和環(huán)境、

水質(zhì)等監(jiān)測;用于醫(yī)學臨床診斷,用于代謝性疾病和遺傳疾病的基因診斷。

核酸試劑盒

RPA技術(shù)主要依賴于三種酶：能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，反應溫度在37°C左右。

重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會發(fā)生鏈交換反應形成并啟動DNA合成，對模板上的目標區(qū)域進行指數(shù)式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合，防止進一步替換。在這個體系中，由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非常快，一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴增產(chǎn)物。RPA擴增的基礎(chǔ)體系(TwistAmp? Basic)含有DNA擴增所需的所有試劑，我們只要準備好引物和模板就行。擴增結(jié)果可以通過凝膠電泳進行終點檢測，產(chǎn)物純化后可用于下游研究。

在這個基礎(chǔ)體系中添入不同的酶和探針，就可以實現(xiàn)多樣化的RPA應用。舉例來說，TwistAmp? exo結(jié)合了exo探針技術(shù)和核酸外切酶III，能實現(xiàn)數(shù)據(jù)的實時讀取，就像熒光定量PCR一樣。不過反應終點的擴增子總量有所減少，適合獲得強熒光信號進行動力學分析，不適合終點檢測(比如跑膠)。將exo探針技術(shù)、核酸外切酶III和逆轉(zhuǎn)錄酶結(jié)合起來，可以一步實現(xiàn)RNA模板的實時擴增。