親和層析的產(chǎn)生背景

殘留檢測(cè)的確證方法主要是儀器分析法,如LC-MS、GC-MS或HPLC,這些方法中因殘留組分量很小,檢測(cè)方法需要較高靈敏度和準(zhǔn)確性。樣品前處理是檢測(cè)技術(shù)的核心,傳統(tǒng)的樣品凈化技術(shù)主要有液—液分配(LLE)、固相萃取(SPE)、基質(zhì)固相分散(MSPD)、超臨界萃取(SFE)等。但是這些凈化技術(shù)通常需要多個(gè)凈化步驟,缺乏選擇性,不但費(fèi)時(shí)繁瑣、容易污染、損失樣本且會(huì)引起嚴(yán)重的本底干擾,降低結(jié)果的可靠性。因此建立有效的樣本凈化技術(shù)已成為痕量分析的主要問(wèn)題。近20年,固相提取領(lǐng)域研究的不斷深入,推進(jìn)了從分析物中選擇性萃取目標(biāo)產(chǎn)物為目的的新技術(shù)發(fā)展(Hennion等,2003)。

親和柱——親和層析介紹

將具有特殊結(jié)構(gòu)的親和分子制成固相吸附劑放置在層析柱中，當(dāng)要被分離的蛋白混合液通過(guò)層析柱時(shí)，與吸附劑具有親和能力的蛋白質(zhì)就會(huì)被吸附而滯留在層析柱中。那些沒(méi)有親和力的蛋白質(zhì)由于不被吸附，直接流出，從而與被分離的蛋白質(zhì)分開(kāi)，然后選用適當(dāng)?shù)南疵撘?，改變結(jié)合條件將被結(jié)合的蛋白質(zhì)洗脫下來(lái)，這種分離純化蛋白質(zhì)的方法稱為親和層析。利用共價(jià)連接有特異配體的層析介質(zhì)分離蛋白質(zhì)混合物中能特異結(jié)合配體的目的蛋白或其它分子的層析技術(shù)。