等溫核酸試劑盒

RNA試劑盒使用方法

使用時一定要根據(jù)自己的實驗需要購買提取試劑盒， 如果不是試劑盒，或許能提出RNA，但不能確保其質(zhì)量以及完整性，會影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護(hù)分析等后續(xù)實驗的結(jié)果。

當(dāng)前提取效果好的是QIANGEN公司生產(chǎn)的RNA提取試劑盒，但其售價較高，單次實驗費用花費太大，對精度要求不高的實驗沒有必要購買，當(dāng)然還有其它的進(jìn)口試劑盒，但是均存在價格高、訂貨周期長的問題（如果碰上國內(nèi)無貨的時候，要從國外發(fā)貨，會等很長一段時間）。普通的提取實驗用國產(chǎn)的試劑盒就足以，價格不高，基本上各地均有現(xiàn)貨，如天根（目前國內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中銷售面比較廣的一種）等，其價格比進(jìn)口試劑盒要便宜許多，且效果還不錯，還可以。

當(dāng)然，就RNA的提取而言，不一定試劑盒的提取效果就非常好，其實采用一些經(jīng)典的RNA提取方法，效果也很不錯，如：TRIZOL、EDTA等，只是試劑盒使用方便，經(jīng)典的方法操作復(fù)雜一些。

什么是RPA?

概念:

重組酶聚合酶擴(kuò)增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術(shù)。RPA技術(shù)主要依賴于三種酶:能結(jié)合單鏈核酸（寡核苷酸引物）的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白（SSB）和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性，適宜反應(yīng)溫度在37°C左右。

核酸試劑盒

TwistAmp? exo 試劑盒為用戶提供了一個exo試劑盒，加上用于實時熒光檢測的引物探針及陽性模板，該模板可與每次檢測反應(yīng)配合使用。

TwistGlow? 沙門氏菌（即用型，可用于實時熒光檢測）和 TwistFlow? 沙門氏菌（即用型，可用于終點側(cè)流檢測）試劑盒均為用戶提供包含靶基因及內(nèi)部質(zhì)控引物探針反應(yīng)組分、一個兩步走的細(xì)胞裂解樣本制備方法，以及可與每次試劑盒反應(yīng)配合使用的模板。

RPA反應(yīng)的適宜溫度在37℃~42℃之間，無需變性，常溫下即可反應(yīng)，大大加快了PCR的速度。并且由于不需要溫控設(shè)備，RPA可以真正實現(xiàn)便攜式的快速核酸檢測。RPA檢測的靈敏度很高，能夠?qū)⒑哿康暮怂?/span>（尤其是DNA）模板擴(kuò)增到可檢出水平，從單個模板分子得到大約1012擴(kuò)增產(chǎn)物。無需復(fù)雜樣品處理，即可實地檢測；既可擴(kuò)增DNA也可擴(kuò)增RNA，省去額外的cDNA合成步驟；檢測方式多樣：終點檢測、對擴(kuò)增過程進(jìn)行實時監(jiān)控或通過側(cè)流層析試紙條（LFD）讀取結(jié)果。

試劑盒包括兩類：①.TwistAmp凍干研發(fā)試劑盒（包括TwistAmp Basic試劑盒、TwistAmp exo 試劑盒和TwistAmp nfo 試劑盒共三種）；②. TwistAmp液態(tài)研發(fā)試劑盒（包括TwistAmp Liquid Basic 試劑盒和TwistAmp Liquid exo 試劑盒共兩種）

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