武漢默沙克生物????科技有限公司是一家專(zhuān)門(mén)從事生物制劑研發(fā)與生產(chǎn)的企業(yè)。目前可提供各種抗1體、免疫學(xué)試劑盒、生化試劑、ELISA試劑盒、分子生物學(xué)試劑等多用途多屬種的高品質(zhì)產(chǎn)品，服務(wù)涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。

心肌細(xì)胞首先合成108個(gè)氨基酸的BNP原，稱(chēng)之為proBNP（BNP前體）。在受到心肌細(xì)胞的刺激后（例如，心肌細(xì)胞拉伸），proBNP在蛋白酶作用下列解為NT-proBNP（氨基末端- proBNP或N端-proBNP）和生物活性激1素BNP。兩種多肽都釋放進(jìn)入血循環(huán)。用無(wú)熱原、無(wú)內(nèi)毒1素的試管或離心管采集血液標(biāo)本，將試管或離心管室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜，使血1清析出。兩者來(lái)源相同并且等摩爾分泌。

BNP與NT-proBNP的不同點(diǎn)主要有如下幾點(diǎn)：

 通常我們可用于ELISA檢測(cè)的樣本是有多種類(lèi)型的，如血1清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等，不同類(lèi)型的檢測(cè)樣本前期的處理方法是不一樣的。心肌細(xì)胞首先合成108個(gè)氨基酸的BNP原，稱(chēng)之為proBNP（BNP前體）。正確的處理樣本是保證ELISA檢測(cè)的正確性和準(zhǔn)確性的步，下面簡(jiǎn)單介紹一下不同類(lèi)型的樣本的處理方法。1、  血1清

血1清是1常用于ELISA檢測(cè)的一類(lèi)樣本，處理也比較簡(jiǎn)單。

用無(wú)熱原、無(wú)內(nèi)毒1素的試管或離心管采集血液標(biāo)本，將試管或離心管室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜，使血1清析出。（1好將試管或離心管傾斜放置，使液面橫截面增大，能使血1清更大程度的析出。②用小鑷子夾取預(yù)先用刀片割開(kāi)的蠟帶，放在乙醇溶液的水面上，使切片展開(kāi)。）4℃ 1000×g離心20分鐘，仔細(xì)收集上清。建議將血1清分裝多份，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。

IgG可被木瓜蛋白酶分解為三個(gè)區(qū)段，其中兩個(gè)相同的區(qū)段稱(chēng)抗原結(jié)合片段（Fab）。每個(gè)Fab都保存結(jié)合抗原的能力，但只有一個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)，是單價(jià)的，與抗原結(jié)合后不出現(xiàn)凝集或沉淀。另一區(qū)段稱(chēng)Fc段，無(wú)抗1體活性，但具有IgG特有的抗原性。

IgG可被胃蛋白酶分解為兩個(gè)片段，一個(gè)Fab雙體，稱(chēng)F（ab'）2，能和兩個(gè)相同的抗原結(jié)合；另一片段類(lèi)似Fc，隨后被分解成小分子多肽，無(wú)生物活性。

IgM是由五個(gè)單體組成的五聚體，含 10個(gè)重鏈和10個(gè)輕鏈，具有10個(gè)抗原結(jié)合價(jià)，由于空間位置的影響，只表現(xiàn)為五個(gè)抗原結(jié)合價(jià)。IgM分子量約為900000，IgG分子量約為150000。

17．脫水Ⅱ

將切片放入95%乙醇中洗去多余的紅色，然后放入無(wú)水乙醇中3-5min。后用吸水紙吸干多余的乙醇。

18．透明

切片放入二甲本Ⅰ、Ⅱ中各5min。

二甲本應(yīng)盡量保持無(wú)水，應(yīng)經(jīng)常更換，或用紗布包無(wú)水硫1酸銅放入染色缸內(nèi)吸收水分。切片如在二甲本中出現(xiàn)白霧現(xiàn)象，說(shuō)明脫水未盡，應(yīng)退回乙醇中重新脫水，否則切片難以鏡檢。

19．封藏：中性樹(shù)膠封存

因切片經(jīng)二甲本透明，使用中性樹(shù)膠作為封藏劑，樹(shù)膠可用二甲本稀釋至合適的稠度。