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在八種人體必需氨基酸中含有六種：異亮氨酸（Ile）為1.21%，亮氨酸（Leu）和苯丙氨酸（Phe）為4.89%，纈氨酸（Val）2.95%，蘇氨酸（Thr）為1.95%，賴氨酸（Lys）為1.94%。 [53-56] 膠原蛋白紫外光譜分析 [57]膠原的相對(duì)分子質(zhì)量大，電泳圖有3條泳帶，在100kD附近出現(xiàn)的2條泳帶分別是膠原分子的α1鏈和α2鏈。

而 Ts值較Td值容易測定。Td還可以表示膠原螺旋被破壞的溫度，另外還與其亞氨基酸（脯氨酸和羥脯氨酸）的含量有關(guān)，尤其是羥脯氨酸含量，它們之間存在正相關(guān)，冷水性魚類的羥脯氨酸含量低，所以冷水性魚類膠原蛋白Td值明顯低于暖水性魚類，而又都低于陸生動(dòng)物。

首先，酶作用時(shí)間必須適當(dāng)。如果時(shí)間過短，膠原蛋白就不能充分釋放到提取液中，影響提取率；如果酶作用時(shí)間過長，膠原蛋白會(huì)水解過度，產(chǎn)生過多的苦味小分子低聚肽，不僅會(huì)增加分離純化的難度，也會(huì)影響膠原蛋白的功能特性和生物活性。

其次，酶解溫度要適宜。溫度過低，酶的作用效果不明顯；溫度過高會(huì)引起酶的失活和膠原蛋白的變性。據(jù)報(bào)道，當(dāng)介質(zhì)pH略低于中性時(shí)，膠原蛋白的變性溫度為40～41℃，當(dāng)介質(zhì)pH為酸性時(shí)，膠原蛋白的變性溫度為38～39℃。而且魚皮膠原蛋白的變性溫度要比豬皮膠原蛋白的變性溫度低7～12℃。