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養(yǎng)殖場熒光定量PCR誠信企業(yè)推薦「多圖」

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發(fā)布時(shí)間:2020-10-28 14:57  






廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務(wù)包括:非洲病毒檢測、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測、非洲檢測、全自動核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測試劑盒。我們的客戶對象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場、養(yǎng)豬場、屠宰場、生豬屠宰場。豬場一線需要快速檢測技術(shù)以盡早確診,做到早處理、早隔離,但要明確的是,豬場只需要通過合適的檢測工具,幫助“定性”即可,不需要深入定量分析,有問題直接捕殺無害化處理。

廣州勱博--博日非洲病毒快速檢測試劑盒

PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)方式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)方式生成模板,從而進(jìn)入平臺期。在傳統(tǒng)的PCR中,常用凝膠電泳分離并用熒光染色來檢測PCR反應(yīng)的終擴(kuò)增產(chǎn)物,因此用此終點(diǎn)法對PCR產(chǎn)物定量存在不可靠之處。實(shí)時(shí)定量PCR(real-timequantitativePCR)是指在PCR指數(shù)擴(kuò)增期間通過連續(xù)監(jiān)測熒光信號強(qiáng)弱的變化來即時(shí)測定特異性產(chǎn)物的量,并據(jù)此推斷目的基因的初始量,不需要取出PCR產(chǎn)物進(jìn)行分離。在real-time Q-PCR中,對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的監(jiān)測和連續(xù)地分析擴(kuò)增相關(guān)的熒光信號,隨著反應(yīng)時(shí)間的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號的變化可以繪制成一條曲線。

廣州勱博--養(yǎng)殖場核酸提取純化

在PCR反應(yīng)早期,產(chǎn)生熒光的水平不能與背景明顯地區(qū)別,而后熒光的產(chǎn)生進(jìn)入指數(shù)期、線性期和終的平臺期,因此可以在PCR反應(yīng)處于指數(shù)期的某一點(diǎn)上來檢測PCR產(chǎn)物的量,并且由此來推斷模板i初的含量。為了便于對所檢測樣本進(jìn)行比較,在real-time Q-PCR反應(yīng)的指數(shù)期,首先需設(shè)定一定熒光信號的域值,一般這個(gè)域值(threshold)是以PCR反應(yīng)的前15個(gè)循環(huán)的熒光信號作為熒光本底信號(baseline),熒光域值的缺省設(shè)置是3~15個(gè)循環(huán)的熒光信號的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和CT值。


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廣州勱博--食品加工企業(yè)/公司/廠核酸提取純化

生豬屠宰企業(yè)作為產(chǎn)業(yè)鏈條上的重要主體,防控動物疫病、保證產(chǎn)品質(zhì)量安全是應(yīng)盡的責(zé)任。屠宰廠(場)生產(chǎn)設(shè)施設(shè)備和環(huán)境一旦被污染,病毒更易長期存活,更易在生豬和豬肉產(chǎn)品中循環(huán)擴(kuò)增,成為病毒的“儲存器”“擴(kuò)增器”。生豬屠宰廠(場)連接著生豬產(chǎn)銷等上下游環(huán)節(jié),便于“順藤摸瓜”及時(shí)發(fā)現(xiàn)和追溯潛在風(fēng)險(xiǎn)。相比其他環(huán)節(jié),在生豬屠宰廠(場)開展檢測更容易采集樣品,實(shí)現(xiàn)i大限度的檢測覆蓋面,結(jié)合臨床和剖檢情況綜合判斷。另外,熒光定量PCR的結(jié)果無需通過瓊脂糖凝膠電泳來評估,大大節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間,提高實(shí)驗(yàn)效率。從目前情況看,大部分屠宰廠(場)能夠開展非洲病毒自檢。

廣州勱博--屠宰場全自動核酸提取純化系統(tǒng)

對檢測的要求是:生豬屠宰廠(場)應(yīng)當(dāng)在駐場官i方獸醫(yī)監(jiān)督下,按照生豬不同來源實(shí)施分批屠宰,每批生豬屠宰后,對暫儲血液進(jìn)行取樣并檢測非洲病毒;或者根據(jù)實(shí)際情況,在生豬進(jìn)場前以生豬運(yùn)輸車輛為單位采集全部生豬血液樣品,混合后進(jìn)行檢測。屠宰過程中發(fā)現(xiàn)疑似非洲典型病變的,要立即停止屠宰,將可i疑生豬轉(zhuǎn)至隔離間,并采集病變組織和血液樣品進(jìn)行檢測。而熒光定量PCR可以在反應(yīng)進(jìn)行過程中進(jìn)行累積擴(kuò)增產(chǎn)物的分析和檢測,即“實(shí)時(shí)”。對檢測結(jié)果應(yīng)用的要求是:屠宰廠(場)檢測非洲病毒為陰性且按照檢疫規(guī)程檢疫合格的,駐場官i方獸醫(yī)方可出具動物檢疫證明,并注明檢測方法、日期和結(jié)果等信息。


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廣州勱博--養(yǎng)殖場病毒核酸提取系統(tǒng)

核酸的提取和純化是法醫(yī)DNA物證檢驗(yàn)的關(guān)鍵技術(shù)之一,目前實(shí)驗(yàn)室i常用的方法包括核酸純化柱(Spin column)磁珠法和clean-up系統(tǒng),磁珠法由于操作簡便、快速,能夠提取到高純度的核酸DNA,并且可以自動化,因此成為目前法醫(yī)DNA實(shí)驗(yàn)室核酸提取純化的主要手段。但磁珠法由于磁珠吸附DNA分子的不均衡、且在后續(xù)洗脫過程中會造成核酸的斷裂和損失,因此在疑難檢材的檢驗(yàn)過程中,存在PCR擴(kuò)增失敗, DNA檢驗(yàn)不成功的情況。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段,PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。

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對豬場實(shí)行非瘟檢測,并不是說要每天/每次都要進(jìn)行檢測,而是基于豬場各區(qū)域/途徑的風(fēng)險(xiǎn)程度制定合適的檢測頻率,高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域檢測頻率相對而言要高些,如引種/車輛/精i液,建議每次采樣檢測,采購飼料/物資產(chǎn)品,建議先試用并隔離做檢測,其余定期監(jiān)測,檢測頻率可按每月或每周進(jìn)行,具體可根據(jù)本場實(shí)際情況而定,可按照場內(nèi)所劃分的管理單元格進(jìn)行全i方位的篩選,從而降低疾病傳入風(fēng)險(xiǎn)。根據(jù)檢測結(jié)果,對發(fā)生疫情的地方嚴(yán)防死守,對疫點(diǎn)地區(qū)生豬全部撲殺,進(jìn)行無害化處理,防止疫情的擴(kuò)散。


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