廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務(wù)包括：非洲病毒檢測(cè)、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測(cè)、非洲檢測(cè)、全自動(dòng)核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測(cè)試劑盒。在相對(duì)定量中，其前提是假設(shè)內(nèi)源控制物不受實(shí)驗(yàn)條件的影響的，合理地選擇合適的不受實(shí)驗(yàn)條件影響的內(nèi)源控制物也是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠與否的關(guān)鍵。我們的客戶對(duì)象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)豬場(chǎng)、屠宰場(chǎng)、生豬屠宰場(chǎng)。

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豬流行性腹瀉病毒和非洲病毒都具有在豬源原料中存活的能力；然而，作用機(jī)制目前尚不清楚。根據(jù)應(yīng)對(duì)流行性腹瀉病毒的經(jīng)驗(yàn)，在不影響動(dòng)物性能和飼料成本的情況下，替換原料的可行性使得很多生產(chǎn)者不再使用豬源原料。廣州勱博--病毒核酸提取系統(tǒng)銷售一個(gè)豬場(chǎng)對(duì)進(jìn)場(chǎng)人員的衣物進(jìn)行熏蒸消毒，專門制作了一個(gè)消毒柜，但由于開始設(shè)計(jì)不理想，消毒柜太大，無法進(jìn)入屋內(nèi)，就放在了舍外。研究表明熱工過程可以殺滅病毒（如流行性腹瀉病毒），但這只能作為緊急緩解措施，因?yàn)檫@要求產(chǎn)品在干燥和運(yùn)輸過程中必須不存在交叉污染。如果生產(chǎn)者認(rèn)可排除豬源原料是可行的，那么還應(yīng)該考慮到那些間接的豬源原料，像添加劑、基礎(chǔ)混合物和那些可能源于豬源的動(dòng)物蛋白或脂肪等。

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首先，養(yǎng)豬場(chǎng)（戶）真正了解所使用的飼料原料的供應(yīng)鏈非常重要。包括：從誰(shuí)那里購(gòu)買了原料？他們又從哪里買到？在運(yùn)輸中是否與其他原料混雜或混合？每個(gè)中轉(zhuǎn)地點(diǎn)的生物安全政策是什么？這些對(duì)于正確評(píng)估原料攜帶外來動(dòng)物疾病的風(fēng)險(xiǎn)非常重要。其次，飼料廠要注重生物安全。在不使用時(shí)蓋住接收坑，有效地控制害蟲，防止灰塵收集系統(tǒng)中的灰塵再循環(huán)回到飼料中，并管理好整個(gè)工廠的人員移動(dòng)。我們的客戶對(duì)象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)豬場(chǎng)、屠宰場(chǎng)、生豬屠宰場(chǎng)。后，養(yǎng)豬場(chǎng)和飼料廠要考慮監(jiān)測(cè)環(huán)境，以實(shí)現(xiàn)生物安全合規(guī)性。環(huán)境監(jiān)測(cè)在人類食品和寵物食品行業(yè)已經(jīng)成為常規(guī)舉措，可以幫助人們發(fā)現(xiàn)生物安全計(jì)劃中的薄弱環(huán)節(jié)。

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豬肉制品加工企業(yè)、生豬產(chǎn)品經(jīng)營(yíng)者采購(gòu)生豬產(chǎn)品應(yīng)當(dāng)批批查驗(yàn)其動(dòng)物檢疫合格證明、肉品品質(zhì)檢驗(yàn)合格證明以及非洲病毒檢測(cè)結(jié)果（報(bào)告），確保購(gòu)進(jìn)的生豬產(chǎn)品不帶非洲病毒；采購(gòu)的進(jìn)口生豬產(chǎn)品應(yīng)附有合法的入境貨物檢驗(yàn)檢疫合格證明。不得采購(gòu)沒有非洲病毒檢測(cè)結(jié)果（報(bào)告）及未經(jīng)檢疫或者檢疫不合格的生豬產(chǎn)品，確保豬肉制品和經(jīng)營(yíng)的生豬產(chǎn)品不含非洲病毒。廣州勱博--博日病毒核酸提取系統(tǒng)在PCR擴(kuò)增中，溶液中的模板變性后低溫退火時(shí)，引物與探針同時(shí)與模板結(jié)合。

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所謂real-time Q-PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)累積實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。在real-time 技術(shù)的發(fā)展過程中，兩個(gè)重要的發(fā)現(xiàn)起著關(guān)鍵的作用：（1）在90年代早期，Taq DNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的發(fā)現(xiàn)，它能降解特異性熒光記探針，因此使得間接的檢測(cè)PCR產(chǎn)物成為可能。如采用常規(guī)的終點(diǎn)檢測(cè)法（利用EB染色來判斷擴(kuò)增產(chǎn)物的多少，從而間接的判斷起始拷貝量），即使起始模板量相同經(jīng)PCR擴(kuò)增、EB染色后也完全有可能得到不同的終點(diǎn)熒光信號(hào)強(qiáng)度。（2）此后熒光雙標(biāo)記探針的運(yùn)用使在一密閉的反應(yīng)管中能實(shí)時(shí)地監(jiān)測(cè)反應(yīng)全過程。這兩個(gè)發(fā)現(xiàn)的結(jié)合以及相應(yīng)的儀器和試劑的商品化發(fā)展導(dǎo)致real-time Q-PCR方法在研究工作中的運(yùn)用。

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在PCR擴(kuò)增中，溶液中的模板變性后低溫退火時(shí)，引物與探針同時(shí)與模板結(jié)合。環(huán)境監(jiān)測(cè)在人類食品和寵物食品行業(yè)已經(jīng)成為常規(guī)舉措，可以幫助人們發(fā)現(xiàn)生物安全計(jì)劃中的薄弱環(huán)節(jié)。在引物的介導(dǎo)下，沿模板向前延伸至探針結(jié)合處，發(fā)生鏈的置換，Taq酶的5′-3′外切酶活性（此活性是雙鏈特異性的，游離的單鏈探針不受影響）將探針5′端連接的熒光基團(tuán)從探針上切割下來，游離于反應(yīng)體系中，從而脫離3′端熒光淬滅基團(tuán)的屏蔽，接受光刺激發(fā)出熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。

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直接的方法指的是標(biāo)記熒光的探針與擴(kuò)增產(chǎn)物結(jié)合后即直接產(chǎn)生熒光，分子信標(biāo)（molecular beacon）就屬于這一類，它本質(zhì)上是一種標(biāo)記熒光的發(fā)夾探針，當(dāng)探針分子呈發(fā)夾結(jié)構(gòu)時(shí)，結(jié)合在其兩端的熒光基團(tuán)距離上接近，使得產(chǎn)生能量轉(zhuǎn)移效應(yīng)，而不發(fā)生熒光。利用已知起始拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品可作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，因此只要獲得未知樣品的Ct值，即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出該樣品的起始拷貝數(shù)。當(dāng)互補(bǔ)序列出現(xiàn)時(shí)，探針與DNA雜交，探針轉(zhuǎn)變成一個(gè)開放的結(jié)構(gòu)，呈線性，報(bào)告熒光基團(tuán)與淬滅熒光基團(tuán)彼此在空間上產(chǎn)生足夠的分離，熒光基團(tuán)脫離了淬滅基團(tuán)的影響，從而產(chǎn)生可被檢測(cè)到的熒光。

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核酸的提取和純化是法醫(yī)DNA物證檢驗(yàn)的關(guān)鍵技術(shù)之一，目前實(shí)驗(yàn)室i常用的方法包括核酸純化柱（Spin column）磁珠法和clean-up系統(tǒng)，磁珠法由于操作簡(jiǎn)便、快速，能夠提取到高純度的核酸DNA,并且可以自動(dòng)化，因此成為目前法醫(yī)DNA實(shí)驗(yàn)室核酸提取純化的主要手段。盡管如此我們也應(yīng)清晰認(rèn)識(shí)到，F(xiàn)Q-PCR技術(shù)在我國(guó)各個(gè)研究領(lǐng)域的應(yīng)用并不多見，這就需要我國(guó)學(xué)者迎頭趕上，使FQ-PCR技術(shù)更充分地i推廣，以推動(dòng)研究工作的快速發(fā)展。但磁珠法由于磁珠吸附DNA分子的不均衡、且在后續(xù)洗脫過程中會(huì)造成核酸的斷裂和損失，因此在疑難檢材的檢驗(yàn)過程中，存在PCR擴(kuò)增失敗， DNA檢驗(yàn)不成功的情況。

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對(duì)豬場(chǎng)實(shí)行非瘟檢測(cè)，并不是說要每天/每次都要進(jìn)行檢測(cè)，而是基于豬場(chǎng)各區(qū)域/途徑的風(fēng)險(xiǎn)程度制定合適的檢測(cè)頻率，高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域檢測(cè)頻率相對(duì)而言要高些，如引種/車輛/精i液，建議每次采樣檢測(cè)，采購(gòu)飼料/物資產(chǎn)品，建議先試用并隔離做檢測(cè)，其余定期監(jiān)測(cè)，檢測(cè)頻率可按每月或每周進(jìn)行，具體可根據(jù)本場(chǎng)實(shí)際情況而定，可按照?qǐng)鰞?nèi)所劃分的管理單元格進(jìn)行全i方位的篩選，從而降低疾病傳入風(fēng)險(xiǎn)。滿足實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡臒晒饣瘜W(xué)物質(zhì)包括DNA結(jié)合染料和熒光標(biāo)記的序列特異引物或探針。