對于生長的組織培養(yǎng)液中的細胞，首先移除培養(yǎng)基，然后加入0.1M HCl處理細胞。孵育10分鐘并觀察細胞是否被裂解；如果裂解不充分，接著孵育10分鐘并觀察。以大于600g離心力于室溫離心，收集上清直接用于實驗。臨用前在0.1M HCl中加入0.1%至1%濃度的Triton-x 100可增強細胞和組織裂解。在這個濃度范圍內，去污劑并不干擾試驗的結合部位，但是會適度的增加光密度值。含有Triton的樣品需利用標準曲線估計濃度，為了較精l確的測定，標準曲線需以相同方式稀釋。取1 mL細胞培養(yǎng)上清加入10μL濃鹽酸，600g離心力于室溫離心，上清液直接用于實驗測定分析。

結果計算

樣品中cAMP濃度有多種計算方法。X軸表示cAMP標準品濃度，Y軸表示凈光密度的平均值或者百分比值。

1 樣品和標準品的凈光密度(OD)平均值的計算：

凈OD平均值 = OD平均值 － NSB孔OD平均值

2 計算不同梯度濃度標準品的結合率占較大結合率(B0孔)的百分比，計算公式 如下：

百分比值 = (凈OD平均值/ B0孔OD平均值)×100

3 繪制凈OD平均值或百分比值對cAMP標準品濃度的Logit-Log曲線。通過插值即可得到樣品中cAMP濃度。

武漢紐斯特生物科技有限公司（WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd），系美國生命科學試劑供應商美國NewEastBio在中國的子公司。公司位于武漢東湖高新技術開發(fā)區(qū)光谷生物城.美國NewEastBio專注于生命科學和生物技術領域，主要產品有小分子、ELISA試劑盒、蛋白等。

Elisa生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在免l疫學檢驗的各領域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血l清或血漿中的抗人類戊型肝l炎（HEV）病毒 IgM 抗l體ELISA檢測。

ELISA法是免l疫診斷中的一項新技術，現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳l染病、寄生l蟲病及非傳l染病等方面的免l疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據(jù)已經(jīng)使用的結果，認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查，而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此，也適合于血l清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗l體，而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學各領域的應用范圍日益擴大，