塞桿密封墊 現(xiàn)象：在高壓下壓力不穩(wěn)定，從泵頭滲漏流動相液體，反映在分析結(jié)果上是樣品保留時間的改變。原因：墊圈與運(yùn)動著的柱塞桿緊緊接觸，是液相色譜系統(tǒng)中易磨損的部件。緩沖液或其它含鹽的流動相更加速墊圈的磨損。如果還是繼續(xù)的老化，不僅對色譜柱有損壞而且始終得不到正常穩(wěn)定的基線。墊圈磨損是不可避免的。措施：一旦墊圈損壞只有進(jìn)行更換。更換時注意要將柱塞桿縮至后，松開泵頭的兩根收緊螺釘，操作時處處以平衡的動作進(jìn)行，切不可搖動或上下擺動泵頭，否則柱塞桿極易折斷。

LC-100液相色譜系統(tǒng)分析前準(zhǔn)備：　　1、流動相前處理：將流動相經(jīng)過0.45um的微孔濾膜過濾后，倒入流動相瓶中，放入超聲波清洗器內(nèi)震蕩排氣20分鐘左右?！　?、流動相安裝：將處理好的流動相放在儲液托盤上，將對應(yīng)通道的洗液管路分別放入流動相瓶中，蓋好瓶蓋并記好對應(yīng)通道的流動相種類?！　?、樣品記錄：將樣品處理稀釋后使用注射1器過濾頭過濾后裝入1.5ml樣品瓶中（大約三分之二），放入自動進(jìn)樣器的樣品架上，并記錄樣品瓶位置以便設(shè)置批處理文件。塞桿現(xiàn)象：液相色譜儀無流動相流出，壓力波動，更換新的墊圈后仍滲漏。　　4、色譜柱安裝：打開柱溫箱門，將色譜柱的出口端安裝在色譜柱夾具上，在色譜柱上連接配管，在色譜柱出口端連接檢測器入口端的藍(lán)色PEEK管。　　5、檢查清洗液：在RINSE通道內(nèi)放置50%甲1醇：水溶液；含有兩根管路的通道內(nèi)放置10%異丙1醇：水溶液。

如何預(yù)防液相色譜儀液相泵的故障：　　要保持泵的良好操作性能，必須維護(hù)系統(tǒng)的清潔，保證溶劑和試劑的質(zhì)量，對流動相進(jìn)行過濾和脫氣.下面列出預(yù)防泵故障的幾項(xiàng)措施：　　1、用高質(zhì)量試劑和HPLC級溶劑；吸附劑的顆粒應(yīng)盡可能保持大小均勻，以保證良好的分離效果，除另有規(guī)定外通常多采用直徑為0?！　?、過濾流動相和溶劑；　　3、脫氣；　　4、每天開始使用時放空排氣，工作結(jié)束后從泵中洗去緩沖液；　　5、不讓水或腐蝕性溶劑滯留泵中；　　6、定期更換墊圈；　　7、需要時加潤滑油；　　8、查閱有關(guān)泵操作手冊中的其它建議。　　處于良好操作狀態(tài)的泵，應(yīng)該能使色譜圖上的基線平穩(wěn)；保留時間的重復(fù)性好。在等度洗脫時壓力波動小于2%。梯度洗脫時壓力變化應(yīng)是緩慢和平穩(wěn)的。　　為了使故障發(fā)生后盡除，平時應(yīng)常備密封、單向閥、泵頭裝置、各式接頭、保險(xiǎn)絲等部件，以及更換工具。

隨著柱填料的快速發(fā)展，反相色譜法的應(yīng)用范圍逐漸擴(kuò)大，現(xiàn)已應(yīng)用于某些無機(jī)樣品或易解離樣品的分析。為控制樣品在分析過程的解離，常用緩沖液控制流動相的pH值。但是并不是說一定要馬上更換，還可以從實(shí)際實(shí)驗(yàn)效果看能否湊合使用。但需要注意的是，C18和C8使用的pH值通常為2.5~7.5(2~8)，太高的pH值會使硅膠溶解，太低的pH值會使鍵合的脫落。有報(bào)告新商品柱可在pH 1.5~10范圍操作。

正相色譜法與反相色譜法比較表

正相色譜法 反相色譜法

固定相極性 高～中 中～低

流動相極性 低～中 中～高

組分洗脫次序 極性小先洗出 極性大先洗出