柱色譜法( Column chromatography)所用色譜管為內(nèi)徑均勻、下端縮口的硬質(zhì)玻璃管，下端用棉花或玻璃纖維塞住，管內(nèi)裝有吸附劑。色譜柱的大小，吸附劑的品種和用量，以及洗脫時的流速，均按各單體中的規(guī)定。吸附劑的顆粒應(yīng)盡可能保持大小均勻，以保證良好的分離效果，除另有規(guī)定外通常多采用直徑為0.07-0.15mm的顆粒。吸附劑的活性或吸附力對分離效果有影響，應(yīng)予注意。吸附劑的填裝 干法：將吸附劑一次加入色譜管，振動管壁使其均勻下沉，然后沿管壁緩緩加入開始層析時使用的流動相，或?qū)⑸V管下端出口加活塞，加入適量的流動相，旋開活使流動相緩緩滴出，然后自管頂緩緩加入吸附劑，使其均勻地潤濕下沉，在管內(nèi)形成松緊適度的吸附層。操作過程中應(yīng)保持有充分的流動相留在吸附層的上面。濕法：將吸附劑與流動相混合，攪拌以除去空氣泡，徐徐傾入色譜管中，然后再加入流動相，將附著于管壁的吸附劑洗下，使色譜柱表面平整。如果柱床出現(xiàn)松動塌陷，無需任何工具，只需輕輕旋動頂端加壓裝置，便能恢復(fù)原柱內(nèi)壓力和柱效。俟填裝吸附劑所用流動相從色譜柱自然流下，液面將柱表面相平時，即加試樣溶液。試樣的加入 除另有規(guī)定外，將試樣溶于層析時使用的流動相中，再沿色譜管壁緩緩加入。注意勿使吸附劑翻起?；?qū)⒃嚇尤苡谶m當(dāng)?shù)娜軇┲?。與少量吸附劑混勻，再使溶劑揮發(fā)去盡后使呈松散狀；將混有試樣的吸附劑加在已制備好的色譜柱上面。如試樣在常用溶劑中不溶解，可將試樣與適量的吸附劑在乳缽中研磨混勻后加入。洗脫 除另有規(guī)定外，通常按流動相洗脫能力大小，遞增變換流動相的品種和比例，分別分部收集流出液，至流出液中所含成分顯著減少或不再含有時，再改變流動相的品種和比例。操作過程中應(yīng)保持有充分的流動相留在吸附層的上面。

購買的小技巧：　　液相色譜儀等分析儀器都有相應(yīng)的國家指標(biāo)，所以我們購買液相色譜儀一定先看是否滿足標(biāo)準(zhǔn)，在選擇廠家以及型號方面多做對比，才能選擇出適合自己使用且性價比高的儀器。液相色譜儀的指標(biāo)比較多，包括檢測器的、泵的等等，他的主要指標(biāo)有漂移、定性定量重復(fù)性、小檢測濃度和噪音，下面我們就看看這幾項的選擇。　　我們先看漂移的指標(biāo)，我們首先需要了解什么是漂移，漂移是指儀器穩(wěn)定后一段時間內(nèi)基線漂離原點的距離，通常用來衡量儀器穩(wěn)定快慢，好的儀器會在很短時間就能穩(wěn)定，提高分析效率。將溶劑入口管從過濾頭和瓶蓋組件處撥下,如果管線中充滿溶劑,當(dāng)過濾頭性能良好時,溶劑會自由地從管中滴出．如果堵塞，就沒有溶劑或只有很少量的溶劑從管中滴出。定性定量重復(fù)性主要是考核儀器穩(wěn)定性的指標(biāo)，這對于分析樣品來說是非常重要的，好的儀器其穩(wěn)定性應(yīng)該是十分的。小檢測濃度是和噪音成正比的，噪音越大，小檢測濃度就越大，靈敏度就越低，某些廠家回避了這個指標(biāo)，說明他們不愿在小檢測濃度的基礎(chǔ)上去比較噪音。對于檢測低含量的樣品就要求儀器的噪音越小越好，否則噪音過大將會導(dǎo)致基線不穩(wěn)，甚至影響分析結(jié)噪音的大小直接關(guān)系到儀器的檢測靈敏度，噪音越大，檢測的靈敏度就越低。

制備液相色譜儀可以滿足常規(guī)實驗室純化制備，并可根據(jù)使用需要，搭配紫外檢測器組成等度系統(tǒng),高壓二元梯度系統(tǒng)，實現(xiàn)實驗室制備提取。廣泛用于制藥、化工、食品、生化，環(huán)保等領(lǐng)域。

　　制備液相色譜儀原理：制備液相色譜是指采用液相色譜技術(shù)制備純物質(zhì)，即分離、收集一種或多種色譜純物質(zhì)。制備液相色譜中的“制備”這一概念指獲得足夠量的單一化合物，以滿足研究和其它用途。遇到這樣的情況，應(yīng)立即將柱溫降到40℃以下，盡快的檢查系統(tǒng)并解決相關(guān)的問題。制備液相色譜的出現(xiàn)，使液相色譜技術(shù)與經(jīng)濟利益建立了聯(lián)系。制備量大小和成本高低是制備液相色譜的兩個重要指標(biāo)。

色譜法分類

按兩相的物理狀態(tài)可分為：氣相色譜法(GC)和液相色譜法(LC)。氣相色譜法適用于分離揮發(fā)性化合物。GC根據(jù)固定相不同又可分為氣固色譜法(GSC)和氣液色譜法(GLC)，其中以GLC應(yīng)用廣。買一套過濾裝置要6000多元，且過濾器公認(rèn)是比較容易損壞的設(shè)備。液相色譜法適用于分離低揮發(fā)性或非揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)。LC同樣可分為液固色譜法(LSC)和液液色譜法(LLC)。此外還有超臨界流體色譜法(SFC)，它以超臨界流體(界于氣體和液體之間的一種物相)為流動相(常用CO2)，因其擴散系數(shù)大，能很快達到平衡，故分析時間短，特別適用于手性化合物的拆分。

按原理分為吸附色譜法(AC)、分配色譜法(DC)、離子交換色譜法(IEC)、排阻色譜法(EC，又稱分子篩、凝膠過濾(GFC)、凝膠滲透色譜法(GPC)和親和色譜法。(此外還有電泳。)

按操作形式可分為紙色譜法(PC)、薄層色譜法(TLC)、柱色譜法。