一般來(lái)說(shuō),涂有極性固定相和較厚涂層的色譜柱老化時(shí)間長(zhǎng),而弱極性固定相和較薄涂層的色譜柱所需時(shí)間較短。而PLOT色譜柱的老化方法有各不相同。 PLOT柱的老化步驟:HLZ Pora 系列 250℃, 8小時(shí)以上Molesieve分子篩 300℃ 12小時(shí)Alumina氧化鋁 200℃ 8小時(shí)以上由于水在氧化鋁和分子篩PLOT柱中的不可逆吸附,使得這兩種色譜柱容易發(fā)生保留行為漂移。當(dāng)柱子分離過(guò)含有高水分樣品后,需要將色譜柱重新老化,以除去固定相中吸附的水分。原因:墊圈與運(yùn)動(dòng)著的柱塞桿緊緊接觸,是液相色譜系統(tǒng)中易磨損的部件。設(shè)置確認(rèn)載氣流速對(duì)于 毛細(xì)管色譜柱,載氣的種類高純度氮?dú)饣驓錃?。載氣的純度大于99.995%,而其中的含氧量越少越好。如果您使用的是 毛細(xì)管色譜柱,那么依照載氣的平均線速度(cm/sec),而不是利用載氣流量(ml/min)來(lái)對(duì)載氣做出評(píng)價(jià)。因?yàn)橹У挠?jì)算采用的是載氣的平均線速度。推薦平均線速度值:氮?dú)猓?0-12cm/sec 氫氣:20-25cm/sec載氣雜質(zhì)過(guò)濾器在載氣的管線中加入氣體過(guò)濾裝置不僅可以延長(zhǎng)色譜柱壽命,而且很大程度的降低了背景噪音。建議安裝一個(gè)高容量脫氧管和一個(gè)載氣凈化器。使用ECD系統(tǒng)時(shí),能在其輔助氣路中也安裝一個(gè)脫氧管。

色譜法,又稱層析法。根據(jù)其分離原理,有吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜與排阻色譜等方法。吸附色譜是利用吸附劑對(duì)被分離物質(zhì)的吸附能力不同,用溶劑或氣體洗脫,以使組分分離。常用的吸附劑有氧化鋁、硅膠、聚酰胺等有吸附活性的物質(zhì)。有兩種方式推薦:(1)的方式當(dāng)然是購(gòu)買實(shí)驗(yàn)室專用純水機(jī),既方便又可靠,質(zhì)量也放心。分配色譜是利用溶液中被分離物質(zhì)在兩相中分配系數(shù)不同,以使組分分離。其中一相為液體,涂布或使之鍵合在固體載體上,稱固定相;另一相為液體或氣體,稱流動(dòng)相。常用的載體有硅膠、硅藻土、硅鎂型吸附劑與纖維素粉等。離子交換色譜是利用被分離物質(zhì)在離子交換樹脂上的離子交換勢(shì)不同而使組分分離。常用的有不同強(qiáng)度的陽(yáng)、陰離子交換樹脂,流動(dòng)相一般為水或含有的緩沖液。排阻色譜又稱凝膠色譜或凝膠滲透色譜,是利用被分離物質(zhì)分子量大小的不同和在填料上滲透程度的不同,以使組分分離。常用的填料有分子篩、葡聚糖凝膠、微孔聚合物、微孔硅膠或玻璃珠等,可根據(jù)載體和試樣的性質(zhì),選用水或?yàn)榱鲃?dòng)相。
制備液相色譜儀的功能: 泵形式:串聯(lián)雙柱塞浮動(dòng)式密封圈。 泵頭自沖洗功能。 “自吸式單向閥”技術(shù),可延長(zhǎng)密封圈使用壽命。 程序化的溶劑類和壓縮因子,可自動(dòng)補(bǔ)償。如果柱床出現(xiàn)松動(dòng)塌陷,無(wú)需任何工具,只需輕輕旋動(dòng)頂端加壓裝置,便能恢復(fù)原柱內(nèi)壓力和柱效。 完整的預(yù)清洗功能,更于快速溶劑更換。 制備液相色譜儀主要用于以下領(lǐng)域: 1、天然化學(xué)、中藥化學(xué):這是國(guó)內(nèi)目前廣泛的使用方法,為了弄清楚植物中的微量有效成分,開放手工色譜柱早已不夠用了,幾乎每個(gè)搞天然藥化的實(shí)驗(yàn)室都至少有一臺(tái)液相,土豪實(shí)驗(yàn)室人手一臺(tái)液相?! ?、蛋白純化:相對(duì)于前者,蛋白純化的起步要稍微晚一點(diǎn),但是發(fā)展很迅速。同時(shí),由于外國(guó)儀器廠家在這個(gè)領(lǐng)域的優(yōu)勢(shì)不算太大,目前國(guó)內(nèi)也在這個(gè)領(lǐng)域加快發(fā)展,搶占地盤?! ?、雜質(zhì)純化:由于合成工藝并不能做到100%的產(chǎn)率,往往伴有副產(chǎn)品,如何獲得微量的雜質(zhì)并確定結(jié)構(gòu)和含量,這就得靠液相色譜。 4、手性化合物的制備:這個(gè)主要是有機(jī)合成和方法學(xué)的在用。

制備液相色譜儀是一種由儲(chǔ)液瓶、高壓泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、廢液瓶六部分組成的儀器。制備型加壓液相色譜,按照色譜柱和樣品量的大小,分為:(1)低壓液相色譜。
制備液相色譜基礎(chǔ)知識(shí)一、液相色譜理論發(fā)展簡(jiǎn)況色譜法的分離原理是:溶于流動(dòng)相( phase)中的各組分經(jīng)過(guò)固定相時(shí),由于與固定相(stationary phase)發(fā)生作用(吸附、分配、離子吸引、排阻、親和)的大小、強(qiáng)弱不同,在固定相中滯留時(shí)間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。
色譜法早是由俄國(guó)植物學(xué)家茨維特(Tswett)在1906年研究用碳酸鈣分離植物色素時(shí)發(fā)現(xiàn)的,色譜法(Chromatography)因之得名。后來(lái)在此基礎(chǔ)上發(fā)展出紙色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、液相色譜法。