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貴州液相色譜誠(chéng)信企業(yè),武漢賽爾夫科技公司

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發(fā)布時(shí)間:2020-08-27 10:34  
制備型加壓液相色譜,按照色譜柱和樣品量的大小,分為:(1)低壓液相色譜;(2)中壓液相色譜;(3)高壓液相色譜;(4)快速色譜。低壓、中壓與高壓液相色譜的壓力范圍之間會(huì)存在一定交疊,沒(méi)有統(tǒng)一、明確的標(biāo)準(zhǔn)。 快速色譜柱壓通常為2bar(或30psi)左右,對(duì)于那些容易分離的簡(jiǎn)單混合物,由于快速色譜具有操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn),常常是實(shí)驗(yàn)室的佳選。但快速色譜不同于一般的層析分離,這種分離沒(méi)有壓力,而快速分離通常使用瓶裝氮?dú)饧訅?,使流?dòng)相具有一定的流速,從而縮短了分離時(shí)間。 快速色譜使用的柱子一般是玻璃柱,柱直徑為3~10cm.長(zhǎng)度為7~15cm??焖偕V中使用廣泛的固定相為硅膠。采用的粒徑通常為:25~40μm,40~63μm或63~200μm的球形固定相。其它如鍵合相、氧化鋁、聚酰胺吸附劑也常用作快速色譜的固定相使用。吸附劑的顆粒應(yīng)盡可能保持大小均勻,以保證良好的分離效果,除另有規(guī)定外通常多采用直徑為0。


液相色譜儀與氣相色譜儀的區(qū)別:

  1.分析對(duì)象的區(qū)別

  GC:適于能氣化、熱穩(wěn)定性好、且沸點(diǎn)較低的樣品;但對(duì)高沸點(diǎn)、揮發(fā)性差、熱穩(wěn)定性差、離子型及高聚物的樣品,尤其對(duì)大多數(shù)生化樣品不可檢測(cè)占有機(jī)物的20%

  HPLC:適于溶解后能制成溶液的樣品(包括有機(jī)介質(zhì)溶液),不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,對(duì)分子量大、難氣化、熱穩(wěn)定性差的生化樣品及高分子和離子型樣品均可檢測(cè)用途廣泛,占有機(jī)物的80%

  2.流動(dòng)相差別的區(qū)別

  GC:流動(dòng)相為惰性,氣體組分與流動(dòng)相無(wú)親合作用力,只與固定相有相互作用。

  HPLC:流動(dòng)相為液體,流動(dòng)相與組分間有親合作用力,能提高柱的選擇性、改善分離度,對(duì)分離起正向作用。且流動(dòng)相種類較多,選擇余地廣,改變流動(dòng)相極性和pH值也對(duì)分離起到調(diào)控作用,當(dāng)選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動(dòng)相也可以增大分離選擇性。檢查氣體過(guò)濾器、載氣、進(jìn)樣墊和襯管等檢查氣體過(guò)濾器和進(jìn)樣墊,保證輔助氣和檢測(cè)器的用氣暢通有效。


超液相色譜儀的分類:  色譜分析法有很多種類,從不同的角度出發(fā)可以有不同的分類方法?! 膬上嗟臓顟B(tài)分類:  色譜法中,流動(dòng)相可以是氣體,也可以是液體,由此可分為氣相色譜法(GC)和液相色譜法(LC)。固定相既可以是固體,也可以是涂在固體上的液體,由此又可將氣相色譜法和液相色譜法分為氣-液色譜、氣-固色譜、液-固色譜、液-液色譜?! ×硗?,還有一種超臨界流體色譜法,超臨界流體色譜是值用超臨界流體做流通相,以固體吸附劑(如硅膠)或鍵合到載體(或毛細(xì)管壁)上的高聚物為固定相的色譜法。不過(guò),輸送泵漏液并不是非得馬上修不可,沖洗干凈并在以后的使用中多加小心一般都可以正常使用。超臨界流體是在高于臨界壓力和臨界溫度時(shí)的一種物質(zhì)狀態(tài),它既不是氣體也不是液體,但兼有氣體和液體的某些性質(zhì)。


液相色譜法開(kāi)始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相,稱為經(jīng)典液相色譜法,此方法柱效低、時(shí)間長(zhǎng)(常有幾個(gè)小時(shí))。液相色譜法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。根據(jù)其分離原理,有吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜與排阻色譜等方法。也稱現(xiàn)代液相色譜。

HPLC的特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn)

HPLC有以下特點(diǎn):

高壓—壓力可達(dá)150~300Kg/cm2。色譜柱每米為75 Kg/cm2以上。

高速—流速為0.1~10.0 ml/min。

—可達(dá)5000塔板每米。在一根柱中同時(shí)分離成份可達(dá)100種。

高靈敏度—紫外檢測(cè)器靈敏度可達(dá)0.01ng。同時(shí)消耗樣品少。





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