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武漢賽爾夫科技有限公司是一家專業(yè)的色譜儀器和色譜消耗品的生產(chǎn)商和供應(yīng)商。我們一直致力于色譜分析和色譜分離純化技術(shù)研究,公司產(chǎn)品包括分析型液相色譜儀,半制備、制備型液相色譜儀。
1958年,基于Moore和Stein的工作,離子交換色譜的儀器化導(dǎo)致了氨基酸分析儀的出現(xiàn),這是近代液相色譜的一個(gè)重要嘗試,但分離效率尚不理想。液相色譜與氣相色譜的比較編輯液相色譜所用基本概念:保留值、塔板數(shù)、塔板高度、分離度、選擇性等與氣相色譜一致。1960年中后期,氣相色譜理論和實(shí)踐發(fā)展,以及機(jī)械、光學(xué)、電子等技術(shù)上的進(jìn)步,液相色譜又開(kāi)始活躍。到60年代末期把高壓泵和化學(xué)鍵合固定相用于液相色譜就出現(xiàn)了HPLC。1970年中期以后,微處理機(jī)技術(shù)用于液相色譜,進(jìn)一步提高了儀器的自動(dòng)化水平和分析精度。1990年以后,生物工程和生命科學(xué)在國(guó)際和國(guó)內(nèi)的迅速發(fā)展,為液相色譜技術(shù)提出了更多、更新的分離、純化、制備的課題,如人類基因組計(jì)劃,蛋白質(zhì)組學(xué)有HPLC作預(yù)分離等。
功能如果所進(jìn)行的色譜分離不是為了純粹的色譜分析,而是為了做其它波譜鑒定,或獲取少量試驗(yàn)樣品的小型制備,餾分收集是必要的;方法①手工,少數(shù)幾個(gè)餾分,手續(xù)麻煩,易出差錯(cuò)。有機(jī)玻璃柱子也能抗壓力耐腐蝕,相對(duì)不銹鋼柱子而言,它是半透明的,可以看到液體的運(yùn)行狀態(tài),對(duì)有色的物質(zhì)其特點(diǎn)就更為突出。②餾分收集器收集,比較理想,微機(jī)控制操作準(zhǔn)確。數(shù)據(jù)獲取與處理功能把檢測(cè)器檢測(cè)到的信號(hào)顯示出來(lái)。
液相色譜更適宜于分離、分析高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、有生理活性及相對(duì)分子量比較大的物質(zhì),因而廣泛應(yīng)用于核酸、肽類、內(nèi)酯、稠環(huán)芳烴、高聚物、、人體代謝產(chǎn)物、表面活性劑,劑、殺蟲(chóng)劑、除莠劑的分析等物質(zhì)的分析。正相液-液分配色譜法(NormalPhaseliquidChromatography):流動(dòng)相的極性小于固定液的極性。高壓泵HPLC使用的色譜柱是很細(xì)的(1~6 mm),所用固定相的粒度也非常?。◣爪蘭到幾十μm),所以流動(dòng)相在柱中流動(dòng)受到的阻力很大,在常壓下,流動(dòng)相流速十分緩慢,柱效低且費(fèi)時(shí)。為了達(dá)到快速、分離,必須給流動(dòng)相施加很大的壓力,以加快其在柱中的流動(dòng)速度。為此,須用高壓泵進(jìn)行高壓輸液。高壓、高速是液相色譜的特點(diǎn)之一。HPLC使用的高壓泵應(yīng)滿足下列條件:a. 流量恒定,無(wú)脈動(dòng),并有較大的調(diào)節(jié)范圍(一般為1~10 mL/min);b. 能抗溶劑腐蝕;c. 有較高的輸液壓力;對(duì)一般分離,60×10^5Pa的壓力就滿足了,對(duì)分離,要求達(dá)到150~300×10^5Pa。
基本原理液相色譜(High Performance Liquid Chromatography,HPLC),是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于20世紀(jì)60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。其原理可用下式表示:X水相Y-水相===XY-有機(jī)相式中:X水相--流動(dòng)相中待分離的有機(jī)離子(也可是陽(yáng)離子)。與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻。因?yàn)檩^小的填充顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送流動(dòng)相,故又稱高壓液相色譜。使用液相色譜時(shí),液體待檢測(cè)物被注入色譜柱,通過(guò)壓力在固定相中移動(dòng),由于被測(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開(kāi)色譜柱,通過(guò)檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào),后通過(guò)分析比對(duì)這些信號(hào)來(lái)判斷待測(cè)物所含有的物質(zhì)。液相色譜作為一種重要的分析方法,廣泛地應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒(méi)有本質(zhì)的差別,它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測(cè)器和微粒固定相,適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。