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HPLC定性分析的主要方法與技術。

使用保留值定性方法

在所有定性分析方法中， HPLC使用保留值定性分析的方法是基本的方法，他就是合理地運用色譜的一些基本知識對有機化合物所作的反應，從而得出有機化合物應具有的性質(zhì)。HPLC中，兩種相同的物質(zhì)在同一色譜中應具有相同的保留值，因此， HPLC中的定性分析就能充分地應用到這一原理，用相同的色譜對未知物質(zhì)進行簡單的成分和性質(zhì)判斷，同時在同一物質(zhì)組分下色譜上形成的未知峰保留值也是一樣的，這樣就可以初步判定未知有機化合物。HPLC的流動相在此基礎上，適當改變流動相來判斷未知有機化合物的基本性質(zhì)，而在連續(xù)變化的過程中，當發(fā)現(xiàn)兩個保留值峰值相同時，我們可以簡單地判斷為未知有機化合物的性質(zhì)相同。盡管 HPLC的保留值定性分析方法可以區(qū)分同樣的物理性質(zhì)，但不能保證具有相同保留值的兩個有機化合物是同一種物質(zhì)，因此在實際應用中， HPLC利用保留值定性分析的方法雖然簡單，而且很具操作性，但適用范圍較窄，不能適應更多未知有機化合物的性質(zhì)判定。

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液相色譜儀輸液系統(tǒng)：

輸注系統(tǒng)即高壓恒流泵，其作用是提供穩(wěn)定、準確的流量。

1、溶劑過濾頭。液體過濾頭或沉淀器主要用于過濾在流動相中可能存在的顆粒狀雜質(zhì)。長期使用后，雜質(zhì)會堵塞溶劑過濾頭的濾板孔隙，或長期使用緩沖液，過濾頭表面很容易形成一層膜，妨礙正常的流動相通過。嚴重者，即使是已經(jīng)超聲處理的溶劑，泵吸液時仍會有氣泡在四氟化輸液管中產(chǎn)生，因此要經(jīng)常清洗。清潔劑可選用乙醇或30%稀硝i酸溶液，正相系統(tǒng)需注意濾頭干燥。

2、單向閥。本單向閥的作用是確保液體朝一個方向流動，保證高壓恒流泵的穩(wěn)定注入。在日常使用中，可通過觀察壓力情況初步判斷流量是否正常。若系統(tǒng)經(jīng)過一定時間平衡，壓力應穩(wěn)定。但是如果有壓力波動，就表示流量是不穩(wěn)定的，如果沒有壓力，表示沒有流動。大多數(shù)情況下都是由于氣門中混入了氣泡或雜質(zhì)。如果出現(xiàn)氣泡，應將放空閥打開，按沖洗鍵將氣泡從內(nèi)部排出。如單向閥與雜質(zhì)混在一起，必須清洗。清潔溶劑可選用乙醇，安裝時要注意標記環(huán)向。

SCIEX毛細管電泳儀代理——廣州聯(lián)方實驗器材有限公司可為您提供實驗室和生產(chǎn)所需要的SCIEX耗材

電泳基本原理：

雙層：

雙電離子層是兩相分離的表面由相對固定和游離的兩部分組成。

雙電離子層是異號表面的離子層，任何浸入液體中的界面都會形成雙電層。對于毛細管電泳，在毛細管電泳中，其表面和壁面均存在雙電層。

Zeta電位：

介電性溶液中的任何帶電粒子都可以看作是雙電層系統(tǒng)的一部分，異號的帶電離子被異號的帶電離子中和，異號離子中有些被不可逆的吸附到離子上，而其他離子游離在附近，擴散到電介質(zhì)中進行離子交換?！付ā闺x子有一個切面，這個切面與離得近的離子間的電位稱為 Zeta電位。