廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務(wù)包括：非洲病毒檢測(cè)、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測(cè)、非洲檢測(cè)、全自動(dòng)核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測(cè)試劑盒。上機(jī)器前最i好離心一下，讓貼在管壁上的液體流下來(lái)同時(shí)也消掉氣泡。我們的客戶對(duì)象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)豬場(chǎng)、屠宰場(chǎng)、生豬屠宰場(chǎng)。

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QF-PCR技術(shù)在國(guó)外已有較廣泛的應(yīng)用，但目前尚未在國(guó)內(nèi)產(chǎn)前診斷臨床中普遍開(kāi)展。此外，用real-timeQ-PCR來(lái)研究mRNA時(shí)，受到不同RNA樣本存在不同的逆轉(zhuǎn)錄（RT）效率的限制。為規(guī)范使用QF-PCR技術(shù)，由國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委i員會(huì)召集、中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院產(chǎn)前診斷中心主辦的"全國(guó)產(chǎn)前篩查與診斷技術(shù)管理規(guī)范編制研討會(huì)"于2015年11月14日在成都召開(kāi)，會(huì)議就QF-PCR等快速產(chǎn)前診斷技術(shù)的臨床應(yīng)用進(jìn)展及其在國(guó)內(nèi)應(yīng)用中存在的具體問(wèn)題進(jìn)行了深入而廣泛的探討，并形成了QF-PCR技術(shù)在產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用專家共識(shí)。

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熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。因?yàn)榘寺?lián)管你需要蓋上蓋子，而且蓋子比較的難按下去，稍不慎就把八聯(lián)管弄斷或者液體撒出來(lái)。其原理： 隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè) 產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。 

廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務(wù)包括：非洲病毒檢測(cè)、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測(cè)、非洲檢測(cè)、全自動(dòng)核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測(cè)試劑盒。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)AppliedBiosystems公司推出，由于該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)。我們的客戶對(duì)象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)豬場(chǎng)、屠宰場(chǎng)、生豬屠宰場(chǎng)。

一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋， 無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。在real-time技術(shù)的發(fā)展過(guò)程中，兩個(gè)重要的發(fā)現(xiàn)起著關(guān)鍵的作用：（1）在90年代早期，TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的發(fā)現(xiàn)，它能降解特異性熒光記探針，因此使得間接的檢測(cè)PCR產(chǎn)物成為可能。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值.

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什么是熒光定量PCR？常規(guī)PCR中，擴(kuò)增產(chǎn)物（擴(kuò)增子）是通過(guò)終點(diǎn)法來(lái)分析檢測(cè)，即PCR反應(yīng)結(jié)束后，DNA通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳，然后進(jìn)行成像分析。而熒光定量PCR可以在反應(yīng)進(jìn)行過(guò)程中進(jìn)行累積擴(kuò)增產(chǎn)物的分析和檢測(cè)，即“實(shí)時(shí)”。②操作簡(jiǎn)單、用時(shí)短，整個(gè)提取流程只有四步，大多可以在36-40分鐘內(nèi)完成。在反應(yīng)體系中加入熒光分子，通過(guò)熒光信號(hào)的按比例增加來(lái)反應(yīng)DNA量的增加，使PCR產(chǎn)物的實(shí)時(shí)檢測(cè)成為可能。滿足實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡臒晒饣瘜W(xué)物質(zhì)包括DNA結(jié)合染料和熒光標(biāo)記的序列特異引物或探針；專門(mén)的熱循環(huán)儀配備熒光檢測(cè)模塊，用于監(jiān)測(cè)擴(kuò)增時(shí)的熒光，檢測(cè)到的熒光信號(hào)反映了每個(gè)循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物的量。

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非洲為何難以控制？非洲病毒基因組全長(zhǎng) 170～190 kb，為有囊膜的雙鏈 DNA 病毒，病毒粒子大小為 175～215 nm，呈正二十面體結(jié)構(gòu)，也是唯i一的蟲(chóng)媒DNA病毒。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。非洲病毒是一種急性、熱性、高度接觸性傳i染病，引起豬的死i亡率可達(dá)100％，并且非洲具有潛伏期，即使感i染病毒，但沒(méi)有臨床癥狀，就有可能通過(guò)非實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)關(guān)卡流入市場(chǎng)，進(jìn)而導(dǎo)致下游食品企業(yè)相關(guān)問(wèn)題的出現(xiàn)。

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非洲與傳統(tǒng)相似且綜合癥狀復(fù)雜難辨，臨床上類似于急性，表現(xiàn)為高熱、皮膚充血、流i產(chǎn)、水腫和臟器出血。我國(guó)因之前不屬于非洲i疫情國(guó)家，因此沒(méi)有相關(guān)的針對(duì)性研究，目前采用的是原農(nóng)i業(yè)部檢疫所于1997年與美國(guó)梅島動(dòng)物病研究所共同研究的檢測(cè)方法，主要是PCR和ELISA，標(biāo)準(zhǔn)遵循GB/T 18648-2002非洲診斷技術(shù)。③安全無(wú)毒，不使用傳統(tǒng)方法中的氯i仿等有毒試劑，對(duì)實(shí)驗(yàn)操作人員的傷害減少到最少，完全符合現(xiàn)代環(huán)保理念。隨著相關(guān)檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，對(duì)于非洲的檢測(cè)方法也更加完善。PCR技術(shù)是目前i簡(jiǎn)單、快速的分子學(xué)檢測(cè)方法，但該方法的敏感性有限，因此以PCR為基礎(chǔ)的更新方法應(yīng)運(yùn)而生。

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一般豬場(chǎng)而言，只需配備非洲快速檢測(cè)試紙條，根據(jù)豬場(chǎng)規(guī)模配備10-50條即可，場(chǎng)里有異常波動(dòng)，就可以及時(shí)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。一定注意取樣方法及注意事項(xiàng)，注意消毒。根據(jù)應(yīng)對(duì)流行性腹瀉病毒的經(jīng)驗(yàn)，在不影響動(dòng)物性能和飼料成本的情況下，替換原料的可行性使得很多生產(chǎn)者不再使用豬源原料。如果不幸檢測(cè)到疑是非洲陽(yáng)性的樣本，建議再反復(fù)多卡檢測(cè)看看，基本上可以做到百i分百準(zhǔn)確率。要是不放心，再送檢相關(guān)部分去做PCR檢測(cè)。豬場(chǎng)一線需要快速檢測(cè)技術(shù)以盡早確診，做到早處理、早隔離，但要明確的是，豬場(chǎng)只需要通過(guò)合適的檢測(cè)工具，幫助“定性”即可，不需要深入定量分析，有問(wèn)題直接捕殺無(wú)害化處理。

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磁珠法核酸提取，具有傳統(tǒng)DNA提取方法無(wú)法比擬的優(yōu)勢(shì)，主要體現(xiàn)在：①能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化、大批量操作，符合生物學(xué)高通量的操作要求，使得傳i染性疾病爆發(fā)時(shí)能夠進(jìn)行快速及時(shí)的應(yīng)對(duì)，這一特點(diǎn)使得傳統(tǒng)方法望塵莫及；廣州勱博--屠宰場(chǎng)熒光定量PCR擴(kuò)增序列特異性檢測(cè)方法是在PCR反應(yīng)中利用標(biāo)記熒光染料的基因特異寡核苷酸探針來(lái)檢測(cè)產(chǎn)物，它又可分為直接法和間接法。②操作簡(jiǎn)單、用時(shí)短，整個(gè)提取流程只有四步，大多可以在36-40分鐘內(nèi)完成；③安全無(wú)毒，不使用傳統(tǒng)方法中的氯i仿等有毒試劑，對(duì)實(shí)驗(yàn)操作人員的傷害減少到少，完全符合現(xiàn)代環(huán)保理念；④磁珠與核酸的特異性結(jié)合使得提取的核酸純度高、濃度大。