蛋白質(zhì)結(jié)晶方法

液-液擴散(Liquid–Liquid Diffusion) 這種方法中，蛋白質(zhì)溶液和含有沉淀劑的溶液是彼此分層在一個有小孔的毛細管中，一個測熔點用的毛細管一般即可（如圖1.2）。下層是密度大的溶液，例如銨或PEG溶液。如果如MPD被用作沉淀劑，它會在上層。以1：1混合，沉淀劑的濃度應(yīng)該是所期終濃度的二倍。兩種溶液（各自約5μl）通過針頭導(dǎo)入毛細管，先導(dǎo)入下層的。通過一個簡易的搖擺式離心機去除氣泡。再加入上層，進而兩層之間形成一個明顯的界面，它們會逐漸彼此擴散。 Garc′?a-Ruiz and Moreno（1994）已經(jīng)發(fā)展液-液擴散技術(shù)至法。蛋白質(zhì)溶液通過毛細力被吸入狹窄的管中，管的一端是封閉的。接著，開放端入置于小容器的凝膠中，凝膠使得管豎直，蛋白質(zhì)溶液與凝膠接觸。含有沉淀劑的溶液被倒在凝膠上，整個裝置被保存于封閉的盒子以防蒸發(fā)。沉淀劑通過凝膠和毛細管的擴散時間可以由毛細管插入凝膠的深度控制，從而蛋白質(zhì)溶液中即可形成過飽和區(qū)域，毛細管底部高而頂部低。這也可作為一個篩選佳結(jié)晶條件的額外信息。

蛋白質(zhì)晶體板是什么

蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)，對蛋白質(zhì)晶體用X射線衍射法解出蛋白質(zhì)分子中各原子排列的三維結(jié)構(gòu)。在晶體中各蛋白質(zhì)分子以有序的晶胞形式重復(fù)排列，其形成受蛋白質(zhì)的純度和濃度、pH值、溫度、沉淀劑等影響。由于遺傳工程、同步輻射裝置、探測和分析技術(shù)、結(jié)晶自動化等技術(shù)的飛躍進步，已獲得的蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)從“蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫”中僅有的7個增加到。為結(jié)構(gòu)生物學(xué)的主要研究對象，對了解生物體內(nèi)蛋白質(zhì)的各種生物學(xué)功能、外界各種因子對細胞的作用、分子設(shè)計等方面提供結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。

蛋白結(jié)晶板作用

隨著人類基因組測序計劃的完成 ,鑒定細胞內(nèi)蛋白質(zhì)表達,結(jié)構(gòu),功能及相互作用方式等成為后基因組時代的主要目標(biāo)之一.為此 ,需要高通量的蛋白質(zhì)組學(xué)研究的技術(shù)和方法.近年來出現(xiàn)的表面增強激光解吸 /電離，蛋白質(zhì)芯片技術(shù)是一種操作簡單 ,方便快捷 ,樣本需要量少 ,敏感性高 ,特異性強的高通量的研究蛋白組學(xué)的方法 ,在蛋白質(zhì)功能分析,標(biāo)志物篩選,研發(fā)等方面具有廣泛的應(yīng)用前景。

蛋白結(jié)晶板

本實用新型屬于生物化學(xué)儀器設(shè)備,所提供的一種蛋白質(zhì)晶體生長用可調(diào)式汽相擴散法結(jié)晶室,包括結(jié)晶室體和 結(jié)晶室座.結(jié)晶室體上有一蛋白質(zhì)池,蛋白質(zhì)池的底面為圓柱面的一部分,結(jié)晶室座上有兩個外液池,一中空的汽室板蓋在結(jié)晶室座上使蛋白質(zhì)池和外液池空間相通 形成汽室,外液池上部設(shè)有金屬電極,底部連通進出液管.結(jié)晶室座上還有垂直交叉的測溫孔和通光槽.本實用新型具有結(jié)構(gòu)新穎緊湊,功能齊全,便于調(diào)整和更換 的優(yōu)點。