等溫核酸試劑盒

據(jù)介紹，RPA檢測(cè)的靈敏度很高，能夠?qū)⒑哿康暮怂?尤其是DNA)模板擴(kuò)增到可以檢出的水平，從單個(gè)模板分子得到大約1012擴(kuò)增產(chǎn)物。而且RPA還用不著復(fù)雜的樣品處理，適用于無(wú)法提取核酸的實(shí)地檢測(cè)。RPA不僅可以對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行終點(diǎn)檢測(cè)，還可以對(duì)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控，甚至可以通過(guò)試紙條(側(cè)流層析試紙條LFD)讀取結(jié)果。

目前，TwistAmp? 試劑盒的擴(kuò)增子長(zhǎng)度在500bp以內(nèi)。不過(guò)，經(jīng)過(guò)特別優(yōu)化的RPA擴(kuò)增，也可以生成更長(zhǎng)的擴(kuò)增產(chǎn)物，或者減慢擴(kuò)增速度(便于定量)，甚至在更低的溫度下進(jìn)行反應(yīng)。

“一般來(lái)說(shuō)，核酸檢測(cè)是目前準(zhǔn)確的診斷方法?！庇腥烁嬖V記者，核酸檢測(cè)試劑盒出現(xiàn)假陰性，即沒(méi)有發(fā)現(xiàn)隱藏的病毒，可能與兩個(gè)方面有關(guān)。一是樣品沒(méi)有采集到。這一點(diǎn)很容易理解。例如，咽拭子采樣時(shí)人比較難受，深度不夠可能會(huì)采集不到含有病毒的樣本。但這樣的情況應(yīng)該很少發(fā)生。

另一個(gè)假陰性的原因是核酸檢測(cè)試劑盒的探針和引物質(zhì)量有波動(dòng)，特別是定量的不造成檢測(cè)的不準(zhǔn)確。換句話說(shuō)，由于這一次各家核酸檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商都是臨時(shí)啟動(dòng)，有些準(zhǔn)備不足，或是執(zhí)行規(guī)定步驟不到位，導(dǎo)致在生產(chǎn)過(guò)程中不進(jìn)行定位，或是酶活性不足，或是酶中含有抑制酶鏈反應(yīng)的重金屬離子等，都可能造成檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陰性。

基本檢測(cè)原理是首先將待檢產(chǎn)物和兩種檢測(cè)物混合，特異性結(jié)合后形成帶有兩種標(biāo)記（生物素和FITC）的復(fù)合物；隨后將該復(fù)合物滴加到試紙條的加樣區(qū)，與加樣區(qū)的膠體金顆粒結(jié)合，新形成的復(fù)合物在層析膜擴(kuò)散作用下擴(kuò)散至檢測(cè)線，只有標(biāo)記有生物素的復(fù)合物會(huì)被生物素配體捕獲，從而使檢測(cè)線“顯色”，而未結(jié)合檢測(cè)物的膠體金顆粒會(huì)繼續(xù)擴(kuò)散至質(zhì)控線并捕獲進(jìn)而使質(zhì)控線“顯色”。

國(guó)內(nèi)核酸試劑企業(yè)快速跟進(jìn)，以公開(kāi)的病毒序列作為靶序列，開(kāi)發(fā)針對(duì)這一病毒的試劑。截至發(fā)稿，動(dòng)脈網(wǎng)從公開(kāi)找到98款已經(jīng)完成開(kāi)發(fā)的熒光PCR法SARS-CoV-2病毒的核酸檢測(cè)試劑盒，當(dāng)然還有很多在研產(chǎn)品和未公布產(chǎn)品信息的試劑盒沒(méi)有被統(tǒng)計(jì)在內(nèi)。

根據(jù)規(guī)定，核酸檢測(cè)試劑在疫情期間可以免臨床試驗(yàn)先上市，后補(bǔ)充臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)，審批有效期為1年。核酸檢測(cè)試劑盒獲國(guó)家局審批上市后，即可進(jìn)入各地醫(yī)院和逐步開(kāi)放的第三方醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所進(jìn)行核酸檢測(cè)，對(duì)疾病預(yù)防控制中心的人群篩查工作形成有力補(bǔ)充。