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Elisa試劑盒實驗原理
將目標包被于微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的結(jié)合,然后加入微生物化的目標,將未結(jié)合的生物素洗凈后,加入HRP標記和親和素,再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關(guān)。在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
Elisa試劑盒操作注意事項
1.Elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按污染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
ELISA試劑盒-ELISA檢測原理介紹
酶聯(lián)吸附試驗(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)指將可溶性的抗原或結(jié)合到聚乙烯等固相載體上,利用抗原結(jié)合專一性進行反應的定性和定量檢測方法。它是應用比較多的一種酶技術(shù)。ELISA試劑盒(ELISAKits)已成為藥品和植物病理學研究中的常用診斷工具,是檢測組織提取液和細胞培養(yǎng)液中目標/抗原的理想工具,也是重要的質(zhì)量控制手段。